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目的：探讨低剂量茴香霉素(ANS)与地塞米松(DEX)联合作用能否逆转急性T-淋巴细胞白血病(ALL)CEM-C1细胞的糖皮质激素(GC)耐药性及其分子机制.方法：分别用1μmol/L DEX、低剂量ANS(0.1μmol/L)及1μmol/L DEX联合0.1μmol/L ANS作用于DEX耐药的T-ALL CEM-C1细胞(DEX敏感细胞株CEM-C7为对照)24h后,MTT法检测细胞生长抑制率的变化;瑞士-姬姆萨染色观察细胞形态学的变化;AnnexinV-PI双染-流式细胞术检测细胞凋亡率的改变;PI单染-流式细胞术检测细胞周期各时相的分布变化;Western blot分析糖皮质激素受体(GR)Ser211位点磷酸化状态、p38-MAPK及JNK磷酸化状态、细胞凋亡相关蛋白及细胞周期相关蛋白的表达变化.为了进一步地探讨DEX联合ANS诱导CEM-C1细胞凋亡的具体机制,用GR、p38-MAPAK及JNK的抑制剂分别提前孵育CEM-C1细胞1h,然后再用1μmol/L DEX联合0.1μmol/L ANS处理CEM-C1细胞.至特定的时间点后,再分析上述各项指标的变化情况.结果：1.与单用DEX或ANS相比,DEX联合低剂量ANS对CEM-C7和CEM-C1细胞的生长抑制、凋亡诱导及细胞周期阻滞作用均有明显的协同效应;Western blot检测则发现联合用药组中促凋亡蛋白Bim的表达上调程度、caspase-3的活化程度及抗凋亡蛋白Bcl-2、Mcl-1的表达下调程度均较单一用药组显著;同时联合用药组中细胞周期调节蛋白CyclinA、CyclinD1和c-myc蛋白的表达下调程度及p27、p21蛋白的表达上调程度亦较单一用药组显著.2.单用DEX对GR(ser211)磷酸化、p38-MAPK及JNK的活化无影响,单用ANS则可轻微激活p38-MAPK及JNK而对GR(ser211)磷酸化无影响,但低剂量ANS联合DEX则可使GR(ser211)、p38-MAPK及JNK磷酸化显著增强,表现为明显的协同效应.3.p38-MAPK的特异性抑制剂SB203580可完全阻断低剂量ANS联合DEX所诱导的p38-MAPK的活化、部分阻断Bim的上调及Mcl-1的下调,并部分逆转低剂量ANS与DEX联合诱导的细胞凋亡,但对GR(Ser211)磷酸化几乎无影响;JNK的特异性抑制剂SP600125可完全阻断低剂量ANS联合DEX诱导的JNK的活化,但对其诱导的Bim的上调、Mcl-1的下调、GR(ser211)磷酸化几乎无影响,也不能逆转低剂量ANS与DEX联合诱导的细胞凋亡;GR的抑制剂RU486则可完全阻断低剂量ANS联合DEX所诱导的GR(ser211)磷酸化、p38-MAPK、JNK的活化,以及Bim的上调、Mcl-1的下调,并完全逆转低剂量ANS与DEX联合诱导的细胞凋亡.结论：低剂量ANS与DEX联合对GC耐药的T-ALL CEM-C1细胞有强烈的生长抑制、凋亡诱导及细胞周期阻滞作用,且二者具有明显的协同效应,其分子机制可能与低剂量ANS联合DEX激活CEM-C1细胞中的GR(ser211)、p38-MAPK及JNK信号通路有关,并且活化的GR(ser211)为p38-MAPK和JNK的上游信号分子.总之,低剂量ANS与DEX联合通过激活GR(ser211)-p38-MAPK/JNK信号通路,进而经线粒体凋亡途径及对细胞周期相关蛋白的调控诱导了CEM-C1细胞凋亡和周期阻滞,从而实现了对CEM-C1细胞GC耐药的逆转.