【摘 要】
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目的 观察细胞内锌缺乏致海马神经细胞损伤过程中DNA 甲基化酶(DNMT)、组蛋白去乙酰化酶(HDAC)活性和HDAC mRNA 表达水平的变化,为进一步阐明缺锌致海马神经细胞损伤的表
【机 构】
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军事医学科学院卫生学环境医学研究所,天津 300050
【出 处】
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中国营养学会第十三次微量元素营养学术会议
论文部分内容阅读
目的 观察细胞内锌缺乏致海马神经细胞损伤过程中DNA 甲基化酶(DNMT)、组蛋白去乙酰化酶(HDAC)活性和HDAC mRNA 表达水平的变化,为进一步阐明缺锌致海马神经细胞损伤的表观遗传机制提供理论依据.方法 将原代培养7d 的大鼠海马神经细胞分为4 组：①对照组(Control)：不加任何处理因素.②缺锌组(TPEN)：培养液中加入2μmol/L 的TPEN,作用24h.③5μmol/L 补锌组(TPEN+5μmol/L ZnSO4)：培养液中加入2μmol/L 的TPEN 及5μmol/L ZnSO4,作用24h.④50μmol/L 补锌组(TPEN+50μmol/L ZnSO4)：培养液中加入2μmol/L 的TPEN 及50μmol/LZnSO4,作用24h.MTT 法检测细胞存活率；免疫酶学法检测HDAC 活性；RT-PCR 法检测DNA甲基转移酶(DNMT3a、DNMT3b)及组蛋白去乙酰化酶HDACs(HDAC1、HDAC2、HDAC3)的mRNA 表达水平.结果 (1)与对照组比较,TPEN 组海马神经存活率明显降低(P＜0.05)；与TPEN组比较,5μmol/L 补锌组和50μmol/L 补锌组均可显著抑制TPEN 诱导的细胞存活率降低(P＜0.05).(2)与对照组比较,TPEN 组海马神经细胞内DNMT1 mRNA 的表达明显增加,DNMT3a mRNA 的表达明显降低(P＜0.05),5μmol/L 补锌组或50μmol/L 补锌组均能够显著抑制TPEN 诱导的DNMT1mRNA 表达上调及DNMT3a mRNA 表达下调(P＜0.05).而与对照组比较,TPEN 组海马神经细胞内DNMT3b mRNA 的表达无明显变化(P＞0.05),与对照组比较,50μmol/L 补锌组DNMT3b mRNA 表达明显上调(P＜0.05).(3)与对照组比较,TPEN 组海马神经细胞内HDAC 活性及HDAC2 的mRNA表达明显升高(P＜0.05),HDAC1 及HDAC3 mRNA 的表达无明显变化(P＞0.05)；5μmol/L Zn 和50μmol/L Zn 能够显著抑制TPEN诱导的HDAC活性及HDAC2 mRNA表达的升高(P＜0.05).结论 细胞内锌缺乏可造成海马神经细胞损伤,其作用机制与DNA 甲基化和组蛋白去乙酰化修饰的改变有关.
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