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目的 肺癌病人的细胞会表达一些弱免疫原性抗原蛋白,如SAGE1蛋白,针对这些已知的特异性抗原蛋白,筛选能杀伤肺癌细胞的特异性T细胞,以期找到能应用于肺癌肿瘤免疫治疗的T细胞受体(TCR).方法 通过免疫共沉淀从肿瘤细胞株样品中鉴别出SAGE1特异性的抗原短肽,再从健康志愿者的血液中分离培养能特异性识别SAGE1抗原短肽的T细胞,经过两轮分选后培养得到特异性单克隆T细胞;抽提mRNA并逆转录成cDNA,PCR扩增获到特异识别SAGE1抗原短肽的TCR并重新转导原代T细胞进行功能验证.原核表达后进行亲和力测定和Tm值.结果 流式检测结果 显示成功从HLA-A2402健康志愿者的淋巴细胞中分选出能特异性识别SAGE1抗原的单克隆T细胞;其扩增出的TCR转导原代T细胞能被SAGE1短肽特异性激活并发生限制性杀伤作用;ProteOn测定此TCR和短肽的pHLA亲和力为4.2μM,DSC结果 显示Tm值为48摄氏度以上.结论 从肿瘤细胞株样品中鉴别出的SAGE1抗原短肽能刺激T细胞增殖,从中分离到的TCR具有正常的细胞生物学活性和较好的特异性,可应用于进一步的临床前研究.