Hr突变体转基因小鼠的构建和表型分析

来源 :第十七届中南地区实验动物科技交流会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:guanxinyang
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无毛基因(Hr)定位于8p12,在染色体上跨越14kb,包含19个外显子,已有研究证明,无毛基因的自发突变能引起人和动物毛发脱落及相关毛发疾病的产生.为深入研究Hr基因的功能,本文利用Gateway技术构建Hr表达载体,在该基因3427位引入点突变为(G→A),通过显微注射建立转基因小鼠.采用PCR方法鉴定出阳性的转基因小鼠,确定首建鼠,通过与C57BL/6小鼠回交后互交数代建系.观察转基因小鼠毛发生长发育规律.取部分皮肤组织石蜡切片,显微镜下分析结果.结果表明,成功构建了pRP(Exp)-EF1A>mHairless mutant>IRES/EGFP真核表达载体,通过与野生型小鼠杂交获得阳性子代,进行同窝交配,传至第2代小鼠出生后14d开始脱发,30d左右脱落的毛发能重新长出.皮肤组织学观察发现脱毛期无毛小鼠毛囊瓦解,真皮内形成大小不等的包囊,毛发重新生长时真皮内见大量新生的毛囊.转基因小鼠脱发时HR蛋白表达量明显高于同龄阴性小鼠.本文成功建立了稳定遗传的Hr突变的转基因小鼠品系,推测无毛基因突变引发了转基因小鼠的脱发,为研究Hr基因的功能提供了良好的动物模型.
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