【摘 要】
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利用免疫共沉淀技术验证CFL2(丝切蛋白)和MEF2C(肌细胞增强因子-2)之间的相互作用关系.构建带绿色荧光蛋白的pEGFP-N1-CFL2和pLenti6.3_MCS_IRES2-EGFP-his-MEF2C重组载体,经
【机 构】
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辽宁医学院畜牧兽医学院,辽宁锦州 121000
【出 处】
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辽宁省畜牧兽医学会2015年学术年会
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利用免疫共沉淀技术验证CFL2(丝切蛋白)和MEF2C(肌细胞增强因子-2)之间的相互作用关系.构建带绿色荧光蛋白的pEGFP-N1-CFL2和pLenti6.3_MCS_IRES2-EGFP-his-MEF2C重组载体,经双酶切鉴定正确后,分别将上述重组载体共转染至人宫颈癌Hela细胞,利用免疫共沉淀方法验证CFL2和MEF2C之间的相互作用关系.结果显示,pEGFP-N1-CFL2和pLenti6.3_MCS_IRES2-EGFP-his-MEF2C重组载体共转染人宫颈癌Hela细胞,分别用抗CFL2和抗MEF2C抗体沉淀蛋白复合物,用抗MEF2C和抗CFL2抗体进行Western blot检测,检测到pLenti6.3_MCS_IRES2-EGFP-his-MEF2C和pEGFP-N1-CFL2的表达.成功构建pEGFP-N1-CFL2和pLenti6.3_MCS_IRES2-EGFP-his-MEF2C真核表达重组载体,在人宫颈癌Hela细胞中表达后利用免疫共沉淀的方法证实了CFL2和MEF2C之间存在相互作用.
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