花鲈(Lateolabrax japonycus)△6去饱和酶(FAD6)的基因克隆,特征分析及其mRNA表达量受饲料中不同链长和去饱和度脂肪酸的影响

来源 :2012年全国博生研究生学术论坛——可持续的水产养殖:理论与实践 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qq978458283
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  本研究运用同源基因克隆法和RACE技术克隆得到了编码花鲈(Lateolabrax japonycus)△6去饱和酶(FAD6)的基因序列.该cDNA全长1920bp,开放阅读框1338bp,编码445个氨基酸.预测蛋白分子量51.8kDa,等电点8.86.通过对氨基酸序列特征分析发现该蛋白含3个跨膜区,6个磷酸化位点(4个丝氨酸位点,2个苏氨酸位点).通过氨基酸序列比对发现,花鲈FAD6与其他种类上已知的FAD6具有很大的相似性.该序列具有属于△6去饱和酶家族的保守区域.实时荧光定量PCR结果显示,FAD6在花鲈脑、眼、肝脏和肠道中的mRNA表达量显著高于其他组织.通过投喂花鲈含不同链长和去饱和度脂肪酸(分别为:C8:0+C10:0;C16:0;C18:0;C18:1n-9;C18:3n-3;DHA+EPA)的饲料10周后,再运用实时荧光定量PCR分析FAD6在实验鱼肝脏中的mRNA表达量,结果表明,投喂C8:0+C10:0及DHA+EPA的处理组肝脏中FAD6mRNA的表达量显著低于其他组(P<0.05).而投喂C16:0的处理组肝脏中FAD6 mRNA的表达量显著高于其他组(P<0.05).投喂C18:0,C18:1n-9及C18:3n-3的处理组间FAD6 mRNA的表达量没有显著性差异(P>0.05).该结果表明,饲料中中链脂肪酸及高不饱和脂肪酸的添加能够抑制花鲈肝脏中△6去饱和酶的表达,而饲料中C16:0的添加能够提高花鲈肝脏中△6去饱和酶的表达.
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