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目的：本课题选取SPARC内源性低表达的脑胶质瘤U87MG细胞作为研究对象,构建SPARC基因复制缺陷型重组腺病毒载体,转染细胞,经鉴定载体构建及转染成功后的细胞,研究其对脑胶质瘤生长及转移的影响.方法：本实验选用阳离子脂质体法,用Lipofectamine2000作为载体将质粒导入细胞,得到的转染效率约50％；采用克隆形成和3H-TdR掺入试验来比较转染前后γ-射线对细胞存活及增殖的影响；单细胞凝胶电泳、流式细胞技术、激光共聚焦扫描等方法分析DNA损伤、细胞周期分布及细胞凋亡的情况.采用RT-PCR和Western Blot检测PI3K、P-AKT的表达水平,观察是否与PI3K/AKT通路的参与有关.体内实验建立裸鼠脑胶质瘤模型,基因转染成功后比较放射治疗前后肿瘤体积的变化,免疫组化观察原位肿瘤内细胞生长、凋亡及血管形成的变化.结果：实验检测了三种脑胶质瘤细胞株中SEMA3B mRNA的表达水平,发现SHG44细胞不表达SEMA3B,而U87MG及U251均表达SEMA3B,无论在何种剂量照射条件下U87MG中SEMA3B的表达量均高于U251.U87MG在受到4Gy辐射剂量照射后出现显著的SEMA3B表达量高峰.故选用U87MG细胞株作为实验对象,4Gy辐射剂量作为实验条件来进行以下的实验.将稳定转染的细胞制备成单细胞悬液,分为SEMA3B沉默组和阴性对照组,予以60Co-γ线照射0、2、4、6、10Gy,辐照后培养10天,经PBS漂洗、甲醇固定、Gimsa染色后于显微镜下计数50个细胞以上的集落.两组细胞,克隆形成数及存活率均随照射剂量的增加而降低,对每组细胞不同剂量组之间进行两两比较可得,两种细胞各剂量组与0Gy对照组比较差异具有统计学意义(P＜0.05).对转染组与空载组细胞存活率以及辐照剂量行两因素分析可得,除0Gy外,相同剂量下两组细胞的存活率之间的差异具有统计学意义,F值为15.42,P＜0.05,有统计学意义.用SigmaPlot软件拟合两组细胞的剂量效应曲线,并计算它们的D0,Dq和SF2值SEMA3B沉默后G0/G1期分布比例与空载组无区别,但SEMA3B沉默使U87MG细胞辐照后G1期阻滞无增加,说明SEMA3B沉默使辐照诱导的G1期阻滞减少,DNA损伤被修复的机会减少,增加细胞的辐射抗性.转染组处在G2/M期百分比较空载组减少,而辐照后转染组在G2/M期百分比较空载组增加,辐照对转染组G2/M期比例的影响即G2期阻滞较空载组明显,说明SEMA3B沉默可以增加细胞在G2阶段的修复机会,增加细胞的辐射抗性.