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表观遗传学是研究在没有细胞核DNA序列改变的情况下,基因功能可逆的、可遗传的改变,也指生物发育过程中包含的程序性研究.表观遗传学研究主要包括组蛋白修饰,染色质重构,micro-RNAs和DNA甲基化.辐射作为已知的致突变和致癌因子可引起表观遗传学效应已被大量的研究所证实.在辐射增加基因组不稳定性和诱发肿瘤的过程中,DNA甲基化的研究自然也成为辐射学者的关注热点.p16基因位于9号染色体短臂,其蛋白由148个氨基酸构成,是细胞周期依赖激酶抑制因子的一员.p16通过抑制Rb蛋白的磷酸化阻断细胞周期G1-S的进程.p16基因作为已知重要的抑癌基因,在肿瘤研究中备受关注.目的：观察在辐射诱导小鼠胸腺淋巴瘤发生中p16基因启动子区域CpG岛甲基化的变化,结合其蛋白及mRNA的表达变化,分析p16基因启动子区域CpG岛甲基化对其基因功能的影响,并寻找受CpG岛甲基化所影响的转录因子.方法：γ射线全身照射C57BL/6J小鼠,单次照射剂量1.75 Gy,每周1次,连续照射4周.照射后6个月处死小鼠,取胸腺,进行病理学检测,建立辐射诱导小鼠胸腺淋巴瘤动物模型.Western-blot方法检测候选基因的蛋白表达变化.采用实时定量PCR检测候选基因的mRNA表达变化.采用BSP的方法检测候选基因启动子区域CpG岛甲基化的改变情况.结果：在辐射诱导的小鼠胸腺淋巴瘤细胞中,p16基因启动子区域CpG岛处于高甲基化状态,共检测了23个CpG岛的甲基化状态,与对照组比较,笫10及11位的CpG位点的DNA甲基化发生率均明显增高,具有统计学意义(P＜0.05).同时,应用生物信息学工具TESS发现,第10及11位的CpG位点是转录因子AP-1和SP-1拟结合点,两个CpG岛的高甲基化必然会影响转录因子AP-1和SP-1与启动序列的结合.在基因表达谱芯片检测中,我们将C57BL/6J小鼠胸腺淋巴瘤及正常胸腺分别同组混合,发现了3063个差异表达基因,其中上调基因1591个,下调基因1472个,下调基因中包括p16基因.在实时定量PCR检测中,p16基因表达呈下调趋势,但由于个体差异较大,没有出现统计学意义.Western-blot方法蛋白检测中发现,与对照组比较,辐射诱导的小鼠胸腺淋巴瘤细胞中p16蛋白表达明显亦降低.结论：在辐射诱导的小鼠胸腺淋巴瘤动物模型中,肿瘤细胞p16基因启动子区域CpG岛处于高甲基化状态,转录因子AP-1和SP-1拟结合点CpG岛甲基化发生率明显增高,p16基因mRNA表达呈下调趋势,p16蛋白表达明显降低.提示在辐射诱导的小鼠胸腺淋巴瘤中,p16基因启动子区域CpG岛的高甲基化对p16基因表达产生重要影响.