【摘 要】
：
脂肪酶是主要工业用酶制剂之一,在食品、洗涤剂和制药等领域广泛应用。本研究将编码米黑根毛霉(Rhizomucor miehe1)脂肪酶RML的基因克隆到pPIC9K载体中,构建了分泌型表达载体pPIC9K—RML,载体经线性化后转化Pichia pastoris GS115,G418梯度筛选获得了分泌表达RML的重组毕赤酵母工程菌,SDS-PAGE分析显示表达的脂肪酶分子量大小与预期一致。初步研究表
【机 构】
：
华南理工大学生物科学与工程学院,广州 510006 华南理工大学生物科学与工程学院,广州 1000
【出 处】
：
2008年全国酶制剂研究开发应用技术研讨会
论文部分内容阅读
脂肪酶是主要工业用酶制剂之一,在食品、洗涤剂和制药等领域广泛应用。本研究将编码米黑根毛霉(Rhizomucor miehe1)脂肪酶RML的基因克隆到pPIC9K载体中,构建了分泌型表达载体pPIC9K—RML,载体经线性化后转化Pichia pastoris GS115,G418梯度筛选获得了分泌表达RML的重组毕赤酵母工程菌,SDS-PAGE分析显示表达的脂肪酶分子量大小与预期一致。初步研究表明：重组脂肪酶最适温度为40℃,最适pH值为8．0,以橄榄油为底物时,发酵上清液酶活最大可达102U／mL,表明构建的重组毕赤酵母工程菌具有较好的工业化生产潜力。
其他文献
本文对覆塑螺纹钢管的研发、生产工艺与设备、工程应用等情况作以技术性概要介绍，同时对执行的技术标准、工程规范加以说明，并提出成套设备制造预期。
本文阐述影响砌块热工性能的主要因素，利用二维模拟分析软件Ptemp，对影响砌块相关参数的因素作了定性的分析，然后对如何在有限的条件下，研制出节能效果更好的砌块以及空心砖作了总结并给出建议。
在蛋白质工程(酶工程)研究中,预测定点突变酶的生物活性是一个重要的研究课题,对提高实验效率,降低实验成本有重要帮助。本文介绍我们新近发展的基于氨基酸理化性质的“物理-化学人工神经网络”(Phys-Chem ANN)及在酶工程中的应用。在生物信息学中广泛使用的“人工神经网络”(Artificial Neural Network：ANN)是以生物体的神经系统(或人的大脑)为模板建立起来的,缺乏物理和化
磷脂酶D(phospholipase D,简称PLD)即磷脂酰胆碱磷脂水解酶(EC 3．1．4．4),是一类特殊的酯键水解酶。在特定条件下,它能催化各种含羟基的化合物结合在磷脂的碱基上,形成新的磷脂,这一特性称为磷脂转移特性,通常也称作碱基交换反应。利用磷腊酶D的碱基转移活性可对磷脂进行改性,制备纯度高的单一磷脂和稀有磷脂,在医药和食品工业中将有极大的应用价值。本文对磷脂酶D的各种酶活检测方法进行
介绍了海藻糖合酶的性质、作用机理及固定化技术。通过探讨海藻糖合酶作用机理及几个固定化技术的实例,探寻适合海藻糖工业化生产的方法,展望海藻糖合酶固定化的研究趋势。
纳豆激酶具有很强的体内外溶栓作用,并具口服吸收溶栓的优点。是一具有开发潜力的食源性溶栓药物。对纳豆激酶分离纯化技术的研究现状和发展趋势进行了综述,讨论了传统的柱层析与新型的超顺磁性聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)微球、膨胀床吸附和反胶团萃取等分离方法,提出了将新型分离技术应用于纳豆激酶的分离以提高其纯度和产率,对大规模生产的分离纯化有一定的指导意义。
丙酮酸是生物体内物质代谢的枢纽,与之相关的酶及代谢途径成为现代基因工程,特别是代谢工程研究的关键,建立简便而有效的检测方法成为丙酮酸代谢相关工程茵研究的前提。本研究基于丙酮酸与2,4-二硝基苯肼发生羰基化反应的原理,建立了优化的丙酮酸检测体系;在研究了常见物质对所建检测体系的影响的基础上,将之推广到发酵产物体系的检测中;利用含有丙酮酸甲酸裂解酶基因的工程茵,进一步验证了检测方法的可行性。
本实验采用酵母菌种A对大豆低聚糖进行发酵纯化,首先利用蔗糖酶将大豆低聚糖液的蔗糖水解为单糖,然后进行纯种酵母发酵培养,消耗掉大豆低聚糖中的单糖及蔗糖,最终使大豆低聚糖溶液中的功能性糖含量占总糖含量的70％以上。