【摘 要】
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生命科学基础领域的研究涵盖基因调控、RNA、表观遗传学、蛋白质科学、细胞信号转导、癌症和其它重大疾病机理等前沿领域,支撑这些研究工作最重要的数据之一就是目的基因
【机 构】
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中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所,上海200031
【出 处】
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第九届中国生命科学公共平台管理与发展研讨会
论文部分内容阅读
生命科学基础领域的研究涵盖基因调控、RNA、表观遗传学、蛋白质科学、细胞信号转导、癌症和其它重大疾病机理等前沿领域,支撑这些研究工作最重要的数据之一就是目的基因在细胞代谢水平上的变化(即代谢物的量变和质变)。大部分细胞代谢物来源于细胞和组织裂解液、血液、血浆、尿液、口腔液以及植物和微生物等复杂样品基质,属于极性的、离子化的、不易挥发的低分子量和热稳定差的化合物,这些化合物虽然含量甚微,但是种类繁多,涵盖了全部的初生代谢产物和结构丰富的次生代谢产物,如氨基酸、糖及其衍生物、脂肪酸、核苷、维生素、激素等,研究它们的组成和种类,以及在野生型和突变体材料中的相对含量的变化,对于我们更好地了解各类代谢物的合成、分解途径以及分子调控机理至关重要。而液相(气相)色谱-质谱联用技术为我们对代谢物质进行定性和定量分析提供了非常有力的帮助。以脂肪酸为例：脂肪酸按碳链长度不同可分为短链脂肪酸(含4-6个碳原子)、中链脂肪酸(含8-14个碳原子)、长链(含16-18个碳原子)和超长链脂肪酸(含20个或更多碳原子)；根据碳氢链饱和度与双键位置的不同又可分为饱和(不饱和)脂肪酸和直链(支链)脂肪酸。对于碳原子数8以上的中长链脂肪酸主要用GC-MS来检测,样品采用硫酸-甲醇衍生化处理,HP-88(Agilent)或者SP-2560(Supelco)毛细管色谱柱对于大多数同分异构体均能够获得较好的分离；而对于碳原子数8以下的短链脂肪酸,由于它们在提取和检测过程中极易损失,且在待测样品中的含量极低,因此采用LC-MS的方法来进行分析,若考虑将样品进行三硝基苯基肼衍生化处理,230nm波长下DAD的信号可明显地增强,可同时满足HPLC和LC-MS分析检测的需求。
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