【摘 要】
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目的:探索激素诱导的股骨头坏死的发病机制.方法:获取健康成人骨髓,经分离、培养、传代后以不同浓度地塞米松成骨诱导液培养,分别于不同的时间点以ALP、茜素红染色,观察细
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目的:探索激素诱导的股骨头坏死的发病机制.方法:获取健康成人骨髓,经分离、培养、传代后以不同浓度地塞米松成骨诱导液培养,分别于不同的时间点以ALP、茜素红染色,观察细胞增殖及成骨分化能力;脱离成骨诱导体系单纯以不同浓度地塞米松干细胞培养液培养骨髓间充质干细胞48小时,获取RNA后送检基因芯片,筛选差异性表达的基因,并进行生物信息学分析,获取此调控途径中的关键microRNA.结果:1.采用密度梯度离心法成功分离出骨髓间充质干细胞。2.10-7mol/L地塞米松成骨诱导骨髓间充质干细胞后,随着时间的延长,其成骨分化较10-9mol/L组差,且细胞成脂肪分化的趋势明显增强。3.不同浓度的地塞米松可导致的miRNA表达差异,且在同种异体个体之间具有相对一致的表达趋势。4.在具有共同表达趋势的miRNA中,选取感兴趣的miRNA进行生物信息学预测分析发现miRNA378, miRNA23, miRNA29的靶荃因分别是成骨信号调节通路上的BMP2, Runx2,DUSP2.结论:1.10-7mol/L地塞米松对于骨髓间充质干细胞的增殖及成骨分化具有明显的抑制作用;2.不同浓度的地塞米松可以导致骨髓间充质干细胞miRNA表达谱的改变,且异常改变的miRNA与成骨分化的调节具有相关性。
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