基于可克隆电镜标记的纳米金颗粒原位合成新技术展示细胞环境中单个蛋白质分子的精确位置

来源 :第四届全国冷冻电子显微学与结构生物学专题研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xxxmmm1236
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精确有效地定位识别细胞中的单个蛋白质分子是当前电子显微学中的一个主要 技术瓶颈.电子显微学家们都非常期待实现类似光学成像领域的GFP的可克隆电 子标记技术来展示每个分子的新型工具.经过五年的攻关,我们终于实现了在细 胞中原位的表达富含半胱氨酸肽段的融合蛋白上特异性合成3nm大小金颗粒的新 型可克隆电镜技术.我们首先通过基因工程设计出具有抗化学固定性能的富含半 胱氨酸的标记肽;然后,构建标记肽和目标蛋白的基因载体,在转基因细胞或 者模式动物中表达这种融合蛋白;最后,将细胞或者组织经化学固定或者冷冻 固定后,在细胞中目标蛋白上合成大约3nm的金颗粒.
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