【摘 要】
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目的:用显微注射法制备携带人p16基因的转基因小鼠.方法:将人的p16cDNA亚克隆至PCR3.1,构建成pCR(R)3.1/p16真核表达质粒,对204只近交系615小鼠进行超排卵,收集受精卵,将人
【机 构】
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中国医科大学遗传教研室,沈阳,110003;沈阳农业大学畜牧兽医学院,沈阳,110161沈阳农业大学畜牧兽医学院,沈阳,110161中国医科大学遗传教研室,沈阳,110003
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目的:用显微注射法制备携带人p16基因的转基因小鼠.方法:将人的p16cDNA亚克隆至PCR3.1,构建成pCR(R)3.1/p16真核表达质粒,对204只近交系615小鼠进行超排卵,收集受精卵,将人p16基因真核表达质粒pCR(R)3.1/p16显微注射到受精卵的原核内.将注射后成活且健康的受精卵移植到假孕母鼠的输卵管内,使其发育直至分娩.PCR分析检测仔鼠基因组中转基因的整合.结果:显微注射510个受精卵,其中成活且健康的350个,卵的成活率为68.62﹪.将其移植到21只假孕母鼠的输卵管内,其中12只假孕母鼠怀孕,并产仔46只,妊娠受体产仔率为22.4﹪总产仔率13﹪.PCR分析45只仔鼠,PCR结果为阴性.本研究仍在进行中.
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