抗髓鞘少突胶质细胞糖蛋白抗体测定方法建立及临床意义

来源 :华东地区神经电生理会议暨2010年浙江省医学会神经病学分会学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wohao1025
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  目的 用分子克隆技术制备高纯度的髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG);建立以放射免疫分析技术(RIA)测定血清抗MOG抗体的新方法,初步探讨抗MOG抗体与MS诊断的相关性;方法 ①用分子克隆技术诱导表达MOGIgd融合蛋白,并通过金属螯合亲和层析法进行纯化;②建立测定血清抗MOG抗体的RIA方法,并应用于动物实验.以Iodogen为氧化剂,以Na125I标记MOGIgd融合蛋白,经Sephadex-G25凝胶层析过滤,获得高纯度的125I-MOGIgd融合蛋白.将48只C57BL/6小鼠随机分为MOG组、硫氧还蛋白(TrxA)、豚鼠脊髓匀浆(GPSCH)和正常对照等4组.分别用MOGIgd融合蛋白、TrxA、GPSCH和生理盐水与CFA的混合抗原乳剂免疫小鼠建立模型,双盲法神经功能评分,30d采集小鼠血清标本,RIA检测模型血清MOG抗体水平;③以RIA检测23例MS和57例CIS、41例其他炎症性神经系统疾病(OIND组)及37例非炎症性神经系统疾病(ONND组)患者的血清和脑脊液配对标本MOG抗体水平,分析MS组和CIS组MRI资料的病灶负荷(BOD)与患者血清中抗MOG抗体水平作相关性.用ROC曲线比较血清抗MOG抗体水平对MS诊断的敏感性和特异性;结果 ①经分子克隆技术诱导表达纯化后,获得分子量为32KD的MOGIgd融合蛋白,最终蛋白浓度为2.91mg/ml;②纯度较高的125I-MOGIgd融合蛋白,标记率为48.4%.小鼠MOG组血清抗MOG抗体水平(4886±381) cpm高于GPSCH组(2071±384)cpm、TrxA组(4391±167) cpm及正常对照组(1747±215) cpm (P<0.01);③MS组血清中抗MOG抗体的水平(3324±574) cpm明显高于与CIS组(2913±570) cpm、OIND组(2651±383) cpm和ONND组(2678±430) cpm (P<0.01).MS组血清抗MOG抗体阳性率(47.8%)明显高于CIS组(17.85%)、OIND组(9.8%)及ONND组(2.7%),MS组活动期血清抗MOG抗体的水平及阳性率高于缓解期期(P<0.05).MS和CIS患者MRI显示的BOD与其血清抗MOG抗体水平呈正相关(P<0.01).抗MOG抗体的ROCAUC为0.78 (P<0.01),高于脑脊液IgG指数(0.58) (P=0.286)、24小时IgG合成率(0.68)(P=0.035)和白蛋白商(0.564) (P=0.651);结论 以高纯度的MOGIgd融合蛋白建立了一种较为敏感的测定血清抗MOG抗体的方法,血清抗MOG抗体对MS有一定的诊断价值.
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