【摘 要】
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目的:利用卵巢特异性启动子(ovarian-specific promoter-1,OSP-1)构建白介素24(interleukin-24,IL-24)基因靶向卵巢癌细胞特异性表达的真核基因表达载体pcDNA3.0-OSP-1-IL-24
【机 构】
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吉林大学第二医院妇产科吉林长春130041
【出 处】
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2012中国医师协会妇产科医师大会
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目的:利用卵巢特异性启动子(ovarian-specific promoter-1,OSP-1)构建白介素24(interleukin-24,IL-24)基因靶向卵巢癌细胞特异性表达的真核基因表达载体pcDNA3.0-OSP-1-IL-24,通过体外实验检测IL-24基因能否靶向抑制卵巢癌细胞的生长,为IL-24基因安全有效地应用于卵巢癌临床治疗提供实验基础.
方法:应用基因重组技术构建重组质粒载体pcDNA3.0-OSP-1-IL-24和对照组质粒载体,然后分别转染人卵巢癌细胞SKOV3、人肝癌细胞HepG2及人成纤维细胞BJ.经G418稳定筛选后,应用RT-PCR及ELISA方法检测各质粒载体在各组细胞内的表达活性,并通过绘制生长曲线及MTT法判断其抑制肿瘤细胞生长的活性.
结果:成功构建了真核表达载体pcDNA3.0-OSP-1-IL-24,其转染的三组细胞中,只有SKOV3细胞可检测到IL-24基因的表达,且只有SKOV3细胞的生长在第6天开始受到明显抑制,而其他两组细胞无明显差异.MTT检测结果分析显示pcDNA3.0-OSP-1-IL-24转染的SKOV3细胞的培养上清与对照组相比,对SKOV3细胞的生长有明显抑制作用.
结论:本研究构建的pcDNA3.0-OSP-1-IL-24载体能特异性抑制卵巢癌细胞的增殖,并具有抗肿瘤的旁观者效应.
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