【摘 要】
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目的 本研究旨在探讨多发性骨髓瘤中mir-137表达水平,并探讨miR-137在多发性骨髓瘤耐药中的作用.方法 收集43例MM初治患者骨髓标本,5株骨髓瘤细胞系(NCI-H929、U266、KMS11、OPM2、RPMI8226),以及正常供者骨髓标本.经磁珠分选患者标本CD138+细胞,提取RNA,采用实时定量PCR检测mir-137的表达情况;提取DNA,经亚硫酸氢盐处理后分别进行甲基化特异性
【机 构】
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中国医学科学院,北京协和医学院,血液学研究所,血液病医院,实验血液学国家重点实验室;天津医科大学,基础医学院,诊断学教研室
【出 处】
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中华医学会第十三次全国白血病·淋巴瘤学术会议
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目的 本研究旨在探讨多发性骨髓瘤中mir-137表达水平,并探讨miR-137在多发性骨髓瘤耐药中的作用.方法 收集43例MM初治患者骨髓标本,5株骨髓瘤细胞系(NCI-H929、U266、KMS11、OPM2、RPMI8226),以及正常供者骨髓标本.经磁珠分选患者标本CD138+细胞,提取RNA,采用实时定量PCR检测mir-137的表达情况;提取DNA,经亚硫酸氢盐处理后分别进行甲基化特异性PCR(methylation—specific polymerase chain reaction,MSP)、亚硫酸盐测序(Bisulfite Genomic Sequence, BSP)和焦磷酸测序的方法检测MM细胞系和MM病人标本中CD138+细胞中miR-137的甲基化状态.分析其甲基化状态与miR-137表达的关系.将慢病毒包装的miR-137高表达载体感染骨髓瘤细胞系NCI-H929,获得稳定细胞系后,使用流式细胞术检测细胞凋亡、CCK-8法增殖、药物敏感性以及染色体不稳定性,并研究确定其靶基因.
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