乙型脑炎病毒贵州分离株E基因原核表达的研究

• 作 者: Xu-jian[1]徐健[2]汤德元[2]Tang-deyuan[1]Li-chunyan[1]李春燕[2]Zeng-zhiyong[1]曾智勇[2]Huang-tao[1]黄涛[2]Wang-bing[1]王彬[2]张晓杰[2]Zhang-xiaojie[1]Wang-feng[1]王凤[2]
• 机 构: College of Animal Science, Guizhou University, Guiyang 550025, China
• 出 处: 第四届中国畜牧科技论坛
• 发表日期: 2009年期

　　根据乙型脑炎病毒SA14和SA14-14-2株序列，设计并合成1对针对E基因的特异性引物，用RT-PCR方法扩增出JEV GZ株E基因片段，将其与pMD19-T载体连接，并转入Top10感受态细胞中，通过抽提阳性质粒酶切鉴定并测序后，将目的片段定向克隆到pET32a(+)中，转化入BL21感受态细胞，经IPTG诱导进行表达。结果表明：表达的目的蛋白经SDS-PAGE和Western blotting分析证实确为乙型脑炎病毒E蛋白，且有生物学活性，该研究为JEV早期诊断试剂盒和基因工程疫苗的研制奠定了一定的基础。