【摘 要】
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铜绿假单胞菌是引起院内感染的重要条件致病菌之一,随着抗生素的滥用,铜绿假单胞菌耐药菌株、多重耐药菌株、泛耐药菌株不断出现,给临床治疗带来了困难.噬菌体(bacteriophage
【机 构】
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工业微生物教育部重点实验室天津市工业微生物重点实验室天津科技大学生物工程学院天津300457
【出 处】
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中国生物工程学会第六次全国会员代表大会暨第九届学术年会
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铜绿假单胞菌是引起院内感染的重要条件致病菌之一,随着抗生素的滥用,铜绿假单胞菌耐药菌株、多重耐药菌株、泛耐药菌株不断出现,给临床治疗带来了困难.噬菌体(bacteriophage)及其裂解酶均具有快速杀灭特定病原菌的能力,两者相比,噬菌体存在一定局限性而裂解酶具有更重要的潜在应用价值.与革兰氏阳性菌相比,革兰氏阴性菌具有致密的外膜,限制了裂解酶对肽聚糖的降解,因此,目前大多数研究为革兰氏阳性菌噬菌体裂解酶,对于革兰氏阴性菌噬菌体裂解酶的研究相对很少.本实验克隆表达了铜绿假单胞菌噬菌体裂解酶,并对其裂解活性进行了检测。为了测定裂解酶Gp57的活性，利用考马斯蓝法（Bradford法）测定蛋白含量，蛋白含量为1.0 mg/mL，利用氯仿饱和的0.05 mol/L Tris缓冲液（pH=7.7）处理铜绿假单胞菌细胞，获得原生质体作为反应底物。加入0.5 mmol/L重组裂解酶Gp57，处理1 h后，底物原生质体细胞OD600降低了32.9％，处理2 h后底物原生质体细胞OD600降低了59.7%，结果显示，该裂解酶具有较强的裂解细菌能力。
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