【摘 要】
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目的 构建包含有犬瘟热病毒(CDV)H、F和N基因的真核表达载体，为制备犬瘟热病毒DNA疫苗做准备.方法 根据Genbank中CDV的基因组序列设计了H、F和N基因的3对引物，通过RT-PCR扩
【机 构】
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中山大学附属第一医院,广东广州510080
【出 处】
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第十四届中南地区实验动物科技交流会
论文部分内容阅读
目的 构建包含有犬瘟热病毒(CDV)H、F和N基因的真核表达载体，为制备犬瘟热病毒DNA疫苗做准备.方法 根据Genbank中CDV的基因组序列设计了H、F和N基因的3对引物，通过RT-PCR扩增病毒基因组，扩增H、F、N基因，并将其克隆入pMD 18T-simple载体上进行测序.使用KpnⅠ和Xho Ⅰ限制性内切酶对重组载体进行双酶切并将目的基因克隆入真核细胞表达载体pcDNA3.1中，构建完成后转染293T细胞，用RT-PCR和Western-blot检测目的基因的转录和目的蛋白的表达.结果 表达载体经转染后，在293T细胞中，目的基因均能转录且正确表达.
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