【摘 要】
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目的:运用神经酰胺处理涎腺腺样囊性癌细胞,分析神经酰胺激活内质网应激和调控肿瘤细胞凋亡的分子机制.方法:采用短链C2-神经酰胺处理涎腺腺样囊性癌ACC-M 细胞和ACC-2 细胞,通过westernblot、RT-PCR 和常规PCR 检测神经酰胺对内质网应激PERK/eIF2α通路、IRE1/XBP1 通路和关键因子Grp78 蛋白表达的影响.运用神经酰胺合成酶抑制剂伏马菌素B1 和下游代谢产物
【机 构】
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口腔疾病研究国家重点实验室(四川大学) 四川大学华西口腔医院
【出 处】
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第九次全国口腔颌面-头颈肿瘤学术研讨会
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目的:运用神经酰胺处理涎腺腺样囊性癌细胞,分析神经酰胺激活内质网应激和调控肿瘤细胞凋亡的分子机制.方法:采用短链C2-神经酰胺处理涎腺腺样囊性癌ACC-M 细胞和ACC-2 细胞,通过westernblot、RT-PCR 和常规PCR 检测神经酰胺对内质网应激PERK/eIF2α通路、IRE1/XBP1 通路和关键因子Grp78 蛋白表达的影响.运用神经酰胺合成酶抑制剂伏马菌素B1 和下游代谢产物1-磷酸鞘氨醇进行验证实验.RT-PCR 检测神经酰胺调控内质网中钙离子通道因子SERCA2α、SERCA2β、SERCA3 和IP3R1 的表达,激光共聚焦显微镜观察内质网钙库中的钙离子释放,并应用4-苯基丁胺和牛磺酸熊去氧胆酸进行阻断实验.通过RT-PCR、western blot 和克隆形成实验观察神经酰胺诱导内质网应激下游凋亡因子激活和细胞死亡的生物学效应.
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