【摘 要】
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目的:建立人神经上皮来源脑肿瘤中肿瘤干细胞的体外分离、培养体系,观察其分化现象,鉴定其特异性标志物,为脑肿瘤干细胞的进一步研究打下基础。 方法:术中取脑肿瘤细胞,接
【机 构】
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中南大学湘雅医院神经外科,410008 湘雅医院神经外科
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目的:建立人神经上皮来源脑肿瘤中肿瘤干细胞的体外分离、培养体系,观察其分化现象,鉴定其特异性标志物,为脑肿瘤干细胞的进一步研究打下基础。
方法:术中取脑肿瘤细胞,接种于含生长因子的无血清培养基培养,使其中的脑肿瘤干细胞增殖,并进行单克隆形成实验及BrdU掺入实验:然后将增殖形成的脑肿瘤干细胞球接种于无生长因子的含血清培养基诱导分化:利用免疫荧光或免疫组化法检测脑肿瘤干细胞在细胞培养或组织切片中CD133和Nestin的表达。
结果:各类肿瘤标本中仅有少数肿瘤细胞能够在无血清培养基中存活并悬浮生长,并增殖形成克隆性脑肿瘤干细胞球,传代后脑肿瘤干细胞仍保持很强的自我更新和增殖能力;在含血清培养基中脑肿瘤干细胞贴壁分化;体外培养中脑肿瘤干细胞表达神经干细胞的特异性标志物CD133和Nestin,在肿瘤组织切片中存在巢状分布的CD133阳性细胞。
结论:人神经上皮来源脑肿瘤组织中存在少量具有自我更新和增殖能力、表达CD133和Nestin的脑肿瘤干细胞,并能在体外将其分离、培养和诱导分化;脑肿瘤干细胞有可能成为脑肿瘤基础研究的新平台和临床治疗的重要靶细胞。
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