【摘 要】
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本试验首先用PCR方法扩增出传染性法氏囊(IBDV)株VP2基因,将其克隆到T载体上,并进行了序列的分析.然后将其亚克隆到真核表达载体pcDNA4/His/LacZ中,并将该真核表达载体上的CM
【机 构】
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北京市农林科学院畜牧兽医研究所(北京)
【出 处】
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中国畜牧兽医学会禽病学分会第12次学术研讨会
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本试验首先用PCR方法扩增出传染性法氏囊(IBDV)株VP2基因,将其克隆到T载体上,并进行了序列的分析.然后将其亚克隆到真核表达载体pcDNA4/His/LacZ中,并将该真核表达载体上的CMV启动子和增强子控制的含LacZ和VP2基因表达盒克隆入pUS2基因中,成功的构建了马立克氏病毒的转移载体.然后,通过脂质体方法转染已感染马立克氏病病毒的鸡胚成纤维细胞(CEF)中,用96孔板稀释法纯化表达LacZ基因的重组CVI988病毒株,获得蓝色的重组病毒.该重组病毒通过PCR方法鉴定证实其基因组中含有完整的传染性法氏囊VP2基因.Western-blot实验证实重组病毒表达了传染性法氏囊VP2蛋白.
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