葡萄病毒B的RT-PCR检测技术研究

来源 :首届干旱半干旱区葡萄产业可持续发展国际学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wuzhihot9
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从感染葡萄病毒B的葡萄皮层中提取总RNA,以其为模板合成cDNA第一链并进行PCR扩增,同时利用提取的总RNA为模板进-步RT-PCR扩增,二者均能获得与预期片段大小一致长约460 bp的扩增产物;回收PCR特异扩增产物,与pUCm-T载体连接,并进行转化、重组克隆的筛选、重组质粒的酶切鉴定和序列测定。扩增片段序列与已报道GVB序列(序列号:x75448)的核苷酸同源性为81[%],从而进一步验证了利用总RNA为模板合成cDNA,进行PCR扩增检测GVB的准确性,可靠性。
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