CHO宿主细胞DNA残留检测QPCR方法的研究

• 作 者: 庄伟亮;葛君;许爱国;文勇;
• 机 构: 江苏先声药物研究有限公司
• 出 处: 第七届全国生化与生物技术药物学术年会
• 发表日期: 2010年期

目的：利用定量PCR(QPCR)技术，建立CHO宿主细胞DNA残留量检测方法。方法：通过磁珠法提取样品的残留DNA，然后对样品和标准DNA进行QPCR，根据标准曲线方程计算样品的DNA残留量。结果：该方法检测CHO细胞DNA的最低检测限为200fg，而且方法特异性地针对CHO细胞，对其它种属的DNA无检测反应。此外，磁殊法提取DNA的回收率可近似为100％。最后通过该方法对三个样品进行DNA残留理检测，检测结果均<100 pg/剂量，符合SFDA标准。