南蛇藤及其活性成分促胆固醇逆转运的作用机制

• 作 者: 张颖;司艳红;翟雷;郭守东;问寒利;张海彦;张雪;陈安滨;秦树存;
• 机 构: 山东省高校动脉粥样硬化重点实验室泰山医学院动脉粥样硬化研究所,山东省泰安市271000
• 出 处: 第十二次全国动脉硬化性疾病学术会议
• 发表日期: 2013年期

　　目的 探讨南蛇藤对高脂饮食喂饲小鼠胆固醇逆转运(RCT)的影响,明确南蛇藤促RCT的活性成分及其分子机制.方法 8周龄雄性C57BL/6J小鼠随机分为普通饮食对照组、高脂饮食组、南蛇藤用药组[10.0 g/(kg·d)].连续药物干预6周后,每组取6只小鼠腹腔注射经氧化型低密度脂蛋白及3H-胆固醇处理过的小鼠巨噬细胞悬液.分别于12、24及48 h取血浆,收集48 h小鼠胆汁、肝脏、小肠及24、48h粪便,闪烁计数仪测定上述组织中的放射活性.剩余各组6只小鼠测定血浆总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)和非高密度脂蛋白胆固醇(non-HDLC)含量.采用RT-PCR分析肝脏RCT相关基因清道夫受体BI(SR-BI)、低密度脂蛋白受体(LDLR)、肝X受体α(LXRα)和胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1)、三磷酸腺苷结合转运蛋白G5/G8(ABCG5/G8)的表达,Western blot检测肝脏中相关基因蛋白的表达.ox-LDL诱导RAW264.7细胞吞噬脂质,体外实验验证南蛇藤及其活性成分南蛇藤素、槲皮素、齐墩果酸、熊果酸、芦丁及山奈酚的促胆固醇外流作用.结果 与高脂饮食组比较,南蛇藤用药组小鼠血浆3H-胆固醇在12 h、24 h分别增高了37％和27％,肝脏和胆汁中分别升高了22％和17％,24 h、48 h粪便中分别增高了42％和17％,而小肠中无明显变化.与高脂饮食组比较,南蛇藤用药组TC下降了17％,HDLC升高了27％.南蛇藤分别上调肝脏中SR-BI、CYP7A1、LDLR、ABCG5的表达,比高脂饮食组增加了12％、23％、22％和16％,而LXRα和ABCG8升高.小肠中ABCG5、ABCG8、LDLR、LXRα分别上调了13％、31％、31％和93％ (P ＜0.05).Western blot检测肝基因蛋白表达亦显示相同结果.细胞实验表明南蛇藤用药组可促进胆固醇外流(13.9％到21.5％).活性成分南蛇藤素、槲度素、齐墩果酸、熊果酸均呈剂量依赖性地促进胆固醇外流.与对照组比较,高剂量的南蛇藤紊和槲皮素升高了22％和17％(P＜0.01).齐墩果酸和熊果酸分别升高了25％和21％.低剂量组芦丁、山奈酚亦可促进胆固醇外流.结论 南蛇藤有效促进高脂诱导小鼠RCT,其机制与改善高脂血症小鼠血脂表型、增强促RCT相关基因表达有关,其有效作用与其活性成分密切相关.