【摘 要】
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[目的与意义]贵州野生枇杷资源丰富,经证实,部分植株对枇杷灰斑病有较强的耐受能力,且适应石漠化所造成的较为严重的干旱条件.在本研究团队的前期工作中,通过以"龙泉1号"
【机 构】
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西南大学园艺园林学院,重庆北碚400716
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[目的与意义]贵州野生枇杷资源丰富,经证实,部分植株对枇杷灰斑病有较强的耐受能力,且适应石漠化所造成的较为严重的干旱条件.在本研究团队的前期工作中,通过以"龙泉1号"天然四倍体与对灰斑病有较强耐受能力的贵州野生枇杷杂交,并获得大量后代.本实验中通过基因组原位杂交技术(Genomic in situ hybridization,GISH)技术对该杂交后代群体中的部分植株进行了分析,以明确杂交的有效性和杂种的真实性.[材料与方法]去壁低渗火焰干燥法,获得天然筛选的"龙泉1号"四倍体枇杷(2n=4x=68)与抗病的贵州野生枇杷二倍体(2n=2x=34)贵州1号、贵州1 8号、贵州56号杂交后代的染色体制片.选取染色体分散良好、形态舒展、凝缩适中、背景干净的分裂相备用.以贵州野生枇杷基因组DNA为探针,采用随机引物法,利用Flourescein-High Prime(罗氏)进行标记.杂交缓冲液中探针浓度为5 ng/μL,以天然四倍体枇杷基因组DNA按探针不同比例浓度为封阻进行基因组原位杂交分析.Olympus BX53型生物显微镜观察拍照,cellSens Standard 1.9进行图片修饰与合成.[结果与分析]利用贵州野生枇杷基因组DNA为探针,"龙泉1号"四倍体枇杷基因组DNA以探针20倍的比例为封阻可以将双亲染色体在杂交后代中清晰区分出来；供试材料中,部分植株染色体数目为51,而其余植株染色体数目则大于或小于51,介于49-52,为非整倍体；所有植株均可检测出来自贵州野生枇杷的17条染色体；可见,母本即"龙泉1号"四倍体除提供染色体数目为34的正常配子外,还提供部分非整倍体性配子,这可能是该四倍体植株减数分裂过程中染色体不均分所致.
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