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目的:Robo2(Roundabout2)及其配体Slit2在后肾发育过程中发挥着重要作用,其表达异常在动物模型中可导致包括膀胱输尿管反流(VUR)在内的多种先天性肾尿路畸形(CAKUT),且已报道有多名VUR患者携带Robo2点突变.传统的纯合敲除小鼠模型几乎完全阻断Rob02的表达,很难很好的模拟患者点突变造成的改变且致使其因严重泌尿系统畸形生后短期死亡,使得对病程进展及功能研究缺乏有效工具.而可存活的嵌合体小鼠模型构建较为复杂.因此研究PiggyBac(PB)转座子插入Robo2突变小鼠的相关表型,以期其可用于更好地研究CAKUT相关疾病的致病机制.方法:Robot突变小鼠由复旦大学发育生物学研究所PB插入突变库获得，插入点位于Robot基因的第一个内含子。分别在生后第一天(新生儿期)、生后，月(青年期)及生后2月(成年期)使用高频超声仪动态观察Robo2PB/PB(纯合)、Robo2PB/+(杂合)小鼠泌尿系统情况。通过对小鼠膀肤内注射亚甲基蓝检测小鼠的反流情况。苏木素-伊红染色(HE)和透射电镜观察肾脏、输尿管及膀肤的病理变化。结果:Western Blot结果显示PB转座子插入有效地阻断了Robot的表达，Robo2PB/Pe泌尿系统仍存在部分Robot的表达。Robot基因缺失导致CAKUT的发病存在一定的剂量效应，Robo2PB/+小鼠没有出现明显的泌尿系统异常;而Robo2PB/PB小鼠可稳定存活并繁殖后代，主要表型为VUR，部分小鼠可见由于肾积水导致的肾发育不良。B超提示部分Robo2Pe/PB小鼠存在肾积水，可合并输尿管积水;一些肾积水新生小鼠合并肾体积增大，膀肤输尿管连接处可见高尔夫球洞样扩张改变。vuR实验提示Robo2PB/PB小鼠存在单侧及双侧反流，且右侧反流多见。日E染色提示输尿管平滑肌纤维结构排列紊乱，与己报道了VUR患儿的病理表型相似。解剖发现部分小鼠存在单侧严重积水合并输尿管增粗，’肾实质受压变薄，肾体积增大，并表现为肾区巨大单房囊肿;其HE染色切片提示肾盏高度扩张，积水导致皮质髓质萎缩，周围肾组织明显萎缩，肾小球血管拌萎缩，球囊腔明显扩张。透射电镜显示Robo2PB/PB小鼠输尿管平滑肌细胞胞浆内大量空泡变，这种改变也曾在VUR患者中报道。结论:Robo2Pe/Pe小鼠的最主要表型为VUR，且其输尿管平滑肌纤维紊乱和平滑肌细胞超微结构改变与己报道的VUR患者相似，能更准确地模拟临床VUR情况。提示其是一个可以用于进一步深入研究VUR病程进展及相关功能的新模型。