【摘 要】
：
目的 研究骨髓内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)移植对5/6肾切除大鼠肾间质微血管密度、肾间质纤维化和上皮细胞转分化的影响.方法 (1)密度梯度离心法分离、培养骨髓单个核细胞,EGM-2特异性培基诱导培养,通过细胞形态观察、细胞免疫荧光细胞表面标志鉴定、摄取DIL-ac-LDL和结合FITC-UEA-Ⅰ能力试验鉴定内皮祖细胞.(2)6周龄SD雌鼠分两步
【机 构】
：
中南大学湘雅二医院小儿肾脏病研究室,湖南 长沙 410011
【出 处】
：
庆祝中国当代儿科杂志创刊15周年大会暨当代儿科论坛
论文部分内容阅读
目的 研究骨髓内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)移植对5/6肾切除大鼠肾间质微血管密度、肾间质纤维化和上皮细胞转分化的影响.方法 (1)密度梯度离心法分离、培养骨髓单个核细胞,EGM-2特异性培基诱导培养,通过细胞形态观察、细胞免疫荧光细胞表面标志鉴定、摄取DIL-ac-LDL和结合FITC-UEA-Ⅰ能力试验鉴定内皮祖细胞.(2)6周龄SD雌鼠分两步行5/6肾切除手术,分模型组、假手术组和EPCs组,术后1周经尾静脉注射1 mL生理盐水或EPCs悬液.(3)分别于注射后3d及1、2、3、4、6、8、12周各处死2只GFP-EPCs组大鼠,取新鲜肾脏、肝脏、脾脏、心脏及血涂片,在荧光显微镜下观察各组织GFP的表达.(4)分别于注射后4周、8周、12周收集尿液和血液用于检测24h尿蛋白定量、血肌酐、尿素氮和内生肌酐清除率,收集肾组织行肾脏间质纤维化评分,计算肾间质微血管密度,用免疫组化、Western blot、Real-Time PCR方法检测TGF-β1、角蛋白、波形蛋白、α-SMA蛋白和基因水平.结果 (1)体外骨髓单个核细胞经EGM-2培基诱导培养先后呈现为圆形、鹅卵石形、梭形、多角形生长,符合内皮祖细胞形态,并同时表达CD133、vWF、和VEGFR-2,能够同时摄取DIL-ac-LDL和结合FITC-UEA-Ⅰ.(2)表达GFP的EPCs逐渐定位于残肾中.(3)EPCs组在第8周和第12周血清尿素氮、肌酐水平较模型组降低,肌酐清除率较模型组升高(P＜0.05)；肾脏间质纤维化较模型组降低,管周毛细血管密度增高(P＜0.05)；EPCs组较模型组残肾组织中TGF-β1 mRNA和蛋白水平均有降低(P＜0.05),波形蛋白、d-SMA mRNA和蛋白表达水平均有下降,角蛋白mRNA和蛋白表达量增高(P＜0.05).结论 (1)成功分离、培养实验骨髓单个核细胞,并诱导分化为骨髓内皮祖细胞.(2)骨髓EPCs通过尾静脉移植进入5/6肾切除模型大鼠后,可以逐渐定位于残肾组织中.(3)骨髓EPCs经尾静脉移植可改善5/6肾切除模型大鼠的肾功能,减轻肾间质纤维化,抑制肾间质毛细血管的减少和上皮转分化的发生程度.
其他文献
目的 探讨可溶性受体CD163在难治性幼年特发性关节炎(SO-JIA)早期的水平变化及其临床意义.方法 收集我院2010年1月至2012年1月确诊为活动期So-JIA的患儿33例，将其作为观察组，另选择同期来我院进行体检的健康儿童40例，作为对照组，采用流式细胞术法测定两组T细胞亚群水平，采用ELISA方法测定血清中CD163水平.观察两组患儿CD163的表达水平及与疾病活动性指标的相关性.结果
目的 探讨伴有新月体的儿童紫癜性肾炎(HSPN)的治疗新方法.方法 对33伴有新月体的儿童紫癜性肾炎进行临床分型及病理分级,33例患儿予大剂量甲基强的松龙冲击、强的松、霉酚酸酯等治疗.结果 33例HSPN患儿分为4种临床类型：(1)孤立性蛋白尿1例(3.0％)；(2)血尿和蛋白尿15例(45.5％)；(3)急性肾炎型4例(12.1％)；(4)肾病综合征型13例(39.4％).病理分级：32例为Ⅲ级
目的 观察系统性红斑狼疮(SLE)患儿外周血Th17细胞表达变化,探讨Th17细胞及其相关的细胞因子在SLE患儿发病中的作用.方法 以正常儿童(对照组,n=15)为对照,流式细胞术(FCM)检测SLE患儿(SLE组,n=25)外周血Th17细胞百分率,用ELISA方法检测外周血血浆IL-17、IL-21水平,分析Th17细胞与SLE活动度之间的关系.结果 与正常对照组相比,SLE患儿外周血中CD3
慢性肾功能衰竭是危及儿童生命的重要疾病之一，我国有1/3患儿在保守治疗阶段被放弃治疗，随防率低。其主要原因是治疗费用高，治疗经费不足。随着国家社会医疗保障制度的完善，特别是2012年8月国家发改委、卫生部等六部委联合制定的《关于开展城乡居民大病保险工作的指导意见》正式公布后，极大解决看病难，看重病更难的问题，为慢性肾功能衰竭患儿就诊提供了强有力的经济支持。在此形势下规范和加强慢性肾功能衰竭患儿的管
目的 探讨儿童慢性肾功能衰竭病因构成比、透析治疗及肾移植的疗效.方法 总结我院1990年1月至2012年6月收治的小儿慢性肾功能衰竭125例临床资料及随访情况.结果 125例慢性肾功能衰竭患儿中慢性肾炎65例(52％),肾病综合征53例(42.4％).75例住院行腹透或血液透析,12例住院期间死亡,大部分因经济困难放弃治疗,现有13例仍存活.50例行肾移植,肾移植前病程4周～11年,49例(98％
目的 探讨检测瓜氨酸合成蛋白抗体(CPA)及其联合抗环瓜氨酸肽抗体(抗CCP)和抗角蛋白抗体(AKA)的检测,在类风湿关节炎(RA)的诊断意义.方法 采用酶联免疫固相吸附试验(ELISA)和间接免疫荧光法测定65例RA患儿血清中的CPA、抗环瓜氨酸肽抗体(抗CCP)和抗角蛋白抗体(AKA)水平.并以99例非RA患儿以及173例健康儿童的CPA检测作为对照.结果 以6.25 U/mL为临界值,CPA
内容提要新生儿机械通气临床应用进展早产儿念珠菌感染LCPUFA的营养支持作用内容提要新生儿机械通气临床应用进展早产儿念珠菌感染LCPUFA的营养支持作用Early CPAP vs.Early Ventilation nCPAP rather than continued mechanical ventilation may be less BPD in countries have been ad
·医学博士**耳鼻咽喉科学·听力学科学硕士·听力学家**获加拿大言语病理学家及听力学家协会(CASLPA)资格认证普遍新生儿听力筛查Universal Newborn Hearing Screening,UNHS听力损失的早期发现及干预Early Hearing Detection&Intervention,EHDI听力问题的早期发现及干预(Early Hearing Detection & In
目的 探讨生物制剂依那西普(恩利)治疗2例幼儿抗中性粒细胞胞浆抗体(anti-neutrophil cytoplasmic antibody,ANCA)相关性血管炎(ASV)的临床疗效及安全性,同时提高对幼儿ANCA相关性血管炎(ASV)的认识.方法 2011年11月至2012年2月期间对我科2例幼儿ASV在激素(每日0.5 mg/kg)+缓解病情药(甲氨蝶呤+纷乐+骁悉)基础上给予皮下注射依那西
医学模式转换新形式对儿科医生的要求怎样能成为优秀的儿科医生心理学医学模式(古代)生物学医学模式社会-心理-生物学医学模式社会-心理-生物医学模式要求:—从注重治疗疾病到治疗病人—从注重治疗疾病到预防为主—从单纯微观研究到宏观和微观研究—从小医疗到大卫生—以医生为中心→以病人为中心→以家庭为中心(以病人为中心以家庭为