【摘 要】
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目的：Cullin3、Klhl3作为E3连接酶泛素离子通道蛋白,在调节水钠平衡,进而调节血压中起重要作用.ω-羟化酶由细胞色素P450 4F2(cytochrome P450 4F2,CYP4F2)编码,在二十羟二十碳四烯酸(20-hydroxyeicosatetraenoic acid,20-HETE)的合成中起主要作用.前期研究证明CYP4F2转基因小鼠的肝、肾中呈现20-HETE合成增加.且
【机 构】
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中国医科大学附属盛京医院临床遗传科
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目的：Cullin3、Klhl3作为E3连接酶泛素离子通道蛋白,在调节水钠平衡,进而调节血压中起重要作用.ω-羟化酶由细胞色素P450 4F2(cytochrome P450 4F2,CYP4F2)编码,在二十羟二十碳四烯酸(20-hydroxyeicosatetraenoic acid,20-HETE)的合成中起主要作用.前期研究证明CYP4F2转基因小鼠的肝、肾中呈现20-HETE合成增加.且CYP4F2转基因小鼠同时呈现高血压和高血糖表型.为了进一步阐明20-HETE在调节血糖和高血压中的作用.本研究通过检测转基因小鼠和野生小鼠肝、肾中Cullin3、Klhl3表达情况,以期进一步探讨Cullin3、Klhl3与血糖和血压的关系.方法：通过Western blot检测Cullin3、Klhl3在转基因小鼠和野生小鼠肝、肾中蛋白的表达.免疫荧光技术检测20-HETE对小鼠肾、肝细胞中Cullin3、Klhl3表达的影响,共聚焦显示二者可能存在的关系. Real-time PCR分别检测二者在小鼠肝、肾中mRNA水平上的改变.结果：Western blot显示在肝脏中20-HETE使Cullin3蛋白表达明显下降.Klhl3无明显变化趋势；Western blot和Real-time PCR显示在肾脏中20-HETE使Cullin3蛋白和mRNA表达明显增高.而Klhl3蛋白水平无明显变化,但mRNA水平明显增高.免疫共聚焦显示二者能够共定位在胞浆中,且呈现与Western blot相同的变化趋势.结论：Cullin3、Klhl3在转基因小鼠和野生小鼠肝、肾中存在差异性表达,这一差异性表达提示20-HETE调节Cullin3、Klhl3及二者的相互作用存在不同组织特异性机制.
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