【摘 要】
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目的 探讨对羟基苯甲酸丁酯(n-BP)对雄性仔鼠的生殖内分泌毒性及其毒性作用机制.方法 采用Wistar大鼠妊娠哺乳期暴露模型,从雌鼠妊娠第7天到哺乳期第21天染毒n-BP.将孕鼠随机分为5组,分别为玉米油对照组、64、160、400、1000 mg· kg-1的n-BP剂量组.分别在雄性子代出生后21,35,49,90和180 d观察生长发育情况,并进行解剖,留取脏器,采集血样,并在90和180
【机 构】
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中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所化学污染与健康安全重点实验室,北京100050 中国疾病预
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目的 探讨对羟基苯甲酸丁酯(n-BP)对雄性仔鼠的生殖内分泌毒性及其毒性作用机制.方法 采用Wistar大鼠妊娠哺乳期暴露模型,从雌鼠妊娠第7天到哺乳期第21天染毒n-BP.将孕鼠随机分为5组,分别为玉米油对照组、64、160、400、1000 mg· kg-1的n-BP剂量组.分别在雄性子代出生后21,35,49,90和180 d观察生长发育情况,并进行解剖,留取脏器,采集血样,并在90和180 d时检测精子参数.采用免疫印迹和荧光定量PCR技术检测睾酮(T)合成途径中重要的酶——类固醇激素急性调节蛋白(STAR)和细胞色素P450侧链裂解酶(P450scc),以及雌二醇(E2)的合成代谢关键酶——芳香化酶(Arom)和雌激素磺基转移酶(Sult1 E1)的转录和蛋白表达水平.采用荧光定量PCR和重亚硫酸盐修饰后测序技术检测大鼠睾丸内甲基化转移酶(Dnmts)的转录水平和ERα启动子区域特异甲基化的程度.结果 n-BP染毒后导致雄性子代肛门生殖器距离(AGD)下降,包皮分离(PPS)时间延迟；在5个不同的时间点血清T显著下降,E2水平显著增加,生殖器官重量不同程度降低；仔鼠成年后(出生后90和180 d)附睾尾精子计数和睾丸每日精子生成量显著减少.n-BP染毒组StAR的转录和蛋白水平显著减少,P450scc转录水平减少而蛋白水平无显著变化.Arom表达显著增加,Suit1 E1表达水平显著降低.Dnmt3b转录水平显著增加,而Dnmt1呈现下降趋势.同时结果显示大鼠睾丸内ERα启动子区域甲基化率呈剂量相关的下降,在1000 mg· kg-1剂量组具有显著性差异.结论 (1)妊娠哺乳暴露n-BP对仔鼠具有通过下丘脑-垂体-性腺轴的生殖发育毒性.(2)n-BP暴露可引起循环中睾酮的减少和雌激素的增加,睾丸甾类合成代谢途径功能受到干扰.其机制可能与StAR/Arom/SULT1 E1相关.(3)妊娠哺乳期n-BP暴露影响成熟期睾丸内甲基化转移酶的水平,从而调控整体基因组的转录水平,抑制或增强下游基因和蛋白的表达.
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