不同浓度的丁香油小鼠局部淋巴结试验-BrdU-ELISA法

来源 :中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhaojunchao2003
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  [目的]当致敏性的外源化合物刺激机体时,可引起局部引流淋巴结淋巴细胞增殖,可以通过局部引流淋巴结淋巴细胞增殖情况来判断外源性化合物致敏性强弱程度.通过选用已知的阳性药丁香油建立小鼠局部淋巴结试验,取代传统的豚鼠致敏试验.[材料和方法]选用10%、25%、50%浓度的丁香油(溶剂均为丙酮∶橄榄油=4∶1)作为阳性对照物,在试验开始的第1天、第2天、第3天,试验组在小鼠双耳耳部涂抹25μl阳性对照物,阴性对照组涂抹25mμl溶剂.试验第6天小鼠腹腔注射0.5ml 10mg/ml BrdU溶液(溶剂为磷酸盐缓冲液),24h后处死动物,记录动物体重,测量双耳厚度,摘取小鼠双侧耳后淋巴结,制备单细胞悬液,ELISA法检测BrdU含量.[结果]受试物致敏性用刺激指数(SI)表示.SI为试验组(阳性对照组)BrdU标记指数与溶剂对照组BrdU标记指数的比值.试验结果表明10%、25%和50%浓度的丁香油刺激指数(SI)分别为1.3、1.6、1.7,并且测量各组耳厚度增加均不超过25%.[结论]25%、50%浓度的丁香油均能引起小鼠局部引流淋巴结淋巴细胞增殖,且呈现剂量-反应关系,随着浓度的增加,刺激指数(SI)增加,阳性对照组(25%、50%浓度)满足SI≥1.6,且不能引起明显的系统毒性或局部刺激(SI≥14),耳厚度增加不应超过25%的条件.
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