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[目的]p53和乳腺癌易感基因1(Breast cancer susceptibility gene 1,BRCA1)都是机体重要的抑癌因子,它们的基因突变与肿瘤的发生发展密切相关。业已证明两种抑癌因子都参与了DNA损伤修复,但它们在调控DNA修复的同源重组(Homologous Recombination,HR)机制中的相互关系却不十分清楚,本研究将对p53和BRCA1在调控HR分子机制中的功能关联性进行探讨。[方法]应用表达同源底物pDR-GFP的乳腺癌细胞系MCF7,通过人乳头状瘤病毒HPV-E6 (HPV-E6)和特异性表达p53的慢病毒载体shRNA (p53shRNA)两个不同手段下调p53的表达,以研究p53对HR的影响；应用特异性表达BRCA1的慢病毒shRNA(BRCA1shRNA)方法下调BRCA1蛋白表达,以研究BRCA1对HR的影响；通过免疫印迹、免疫荧光和免疫共沉淀法检测p53和BRCA1蛋白之间相互功能关系；通过real-time PCR方法检测在转录水平上两个基因之间的相互调控关系；应用细胞克隆形成和FISH方法分别检测细胞放射敏感性和基因组稳定性。[结果]通过HPV-E6和p53shRNA两种方法成功下调p53表达后,均导致HR效率升高,提示p53具有抑制HR过度修复(hyper-recombination)的作用；与其相反,BRCA1shRNA下调BRCA1表达后,HR效率也下降,表明BRCA1具有促进HR活性的作用。进一步发现p53能抑制BRCA1蛋白的过度表达以及BRCA1和重组酶Rad51在DNA损伤区过度蓄积,p53和BRCA1共存于一个蛋白复合物,揭示在应答DNA损伤反应中,p53可能主要是通过抑制BRCA1-Rad51-HR修复通路而防止HR的过度修复。研究结果还发现在转录水平上p53就能抑制BRCA1基因的过度表达。还有,p53缺欠所致的过度修复增强了细胞对辐射的耐受性和染色体的稳定性。此外,在BRCA1缺欠细胞中下调p53表达也发现HR效率被上调、细胞对辐射耐受性和基因组稳定性被增强,表明p53还可以不依赖于BRCA1参与DNA损伤修复过程。[结论]在HR调控的分子机制中存在p53介导的抑制HR和BRCA1介导的促进HR两个通路,这两个相反通路在转录和可能的转录后水平上存在功能相关性,维持这两个HR通路处于平衡状态将可能有助于预防肿瘤的发生和发展。