【摘 要】
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目的 研究银染增强的纳米金探针技术的优化条件,并构建利用该方法检测结核分枝杆菌IS6110 基因的检测体系,实现对临床痰标本中结核分枝杆菌的快速、高灵敏度检测.方法 以结核分枝杆菌的IS6110 基因为目标基因,通过PCR 特异性扩增IS6110 基因,靶基因分别与互补的纳米金标记的信号探针,生物素标记的捕获探针杂交,形成―生物素捕获探针-靶序列–纳米金信号探针‖三明治杂交结构,然后经生物素- 链
【机 构】
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中南大学湘雅医学院医学检验系 湖南省结核病防治所
【出 处】
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中华医学会第八次全国中青年检验医学学术会议
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目的 研究银染增强的纳米金探针技术的优化条件,并构建利用该方法检测结核分枝杆菌IS6110 基因的检测体系,实现对临床痰标本中结核分枝杆菌的快速、高灵敏度检测.方法 以结核分枝杆菌的IS6110 基因为目标基因,通过PCR 特异性扩增IS6110 基因,靶基因分别与互补的纳米金标记的信号探针,生物素标记的捕获探针杂交,形成―生物素捕获探针-靶序列–纳米金信号探针‖三明治杂交结构,然后经生物素- 链霉亲和素作用将靶序列锚定在包被链酶亲和素的固相载体酶标孔内,通过纳米金催化的银染放大效应产生高灵敏的识别信号,在酶标仪上检测其吸光度值,收集临床疑似肺结核患者痰标本50 份,用银染增强的纳米金探针方法进行检测,检测结果与临床细菌分离培养鉴定法和PCR 法结果进行比较.
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