【摘 要】
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目的:通过RT�PCR方法检测人参皂甙Rg3在荷瘤小鼠淋巴道转移中基质金属蛋白酶MMP9、细胞粘附分子CD44v6的表达,进一步阐述人参皂甙Rg3抗淋巴道转移的药理作用及机制.方法:制备荷瘤小鼠,取肝癌Hca-F25//6A3-F系冻存细胞解冻,接种于615系小鼠腹腔,取第二代腹水(细胞存活率在95%以上),以2×106/ml浓度,接种于615系小鼠的右足垫,0.2ml/只,建立动物肿瘤淋巴
【机 构】
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116011,大连,大连医科大学附属第一医院肿瘤科 116027,大连,大连医科大学附属第二医院
【出 处】
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中国抗癌协会临床肿瘤学协作中心第五届学术年会
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目的:通过RT�PCR方法检测人参皂甙Rg3在荷瘤小鼠淋巴道转移中基质金属蛋白酶MMP9、细胞粘附分子CD44v6的表达,进一步阐述人参皂甙Rg3抗淋巴道转移的药理作用及机制.
方法:制备荷瘤小鼠,取肝癌Hca-F25//6A3-F系冻存细胞解冻,接种于615系小鼠腹腔,取第二代腹水(细胞存活率在95%以上),以2×106/ml浓度,接种于615系小鼠的右足垫,0.2ml/只,建立动物肿瘤淋巴道转移模型,将实验分为五组,人参皂甙Rg3提前给药组(预防组)、人参皂甙Rg3接瘤后给药组(治疗组)、两药合用组(人参皂甙Rg3+顺铂)、阳性对照组(顺铂)、阴性对照组(生理盐水)加以治疗,半月后截去瘤体,继续给药.取原发瘤及转移瘤,提取RNA,反转录成CDNA,设计所需引物,进行RT�PCR,1.2%-1.4%的琼脂糖凝胶电泳,从分子水平检测促癌基因及抑癌基因表达.
结果:从凝胶电泳图像上及GIS软件对MMP9、CD44v6、GAPDH电泳图像的条带密度比较结果中分析,应用人参皂甙Rg3组MMP9、CD44v6不表达或弱表达,而阴性对照组表达增强.各组中,以顺铂和Rg3两药合用组抗肿瘤生长及转移效果最为明显,阴性对照组最差,Rg3预防组、治疗组及阳性对照组(DDP)较好(凝胶成像结果从略).
结论:人参皂甙Rg3抗淋巴道转移的机制之一与降低粘附分子CD44v6可能与降低了CD44v6的分泌,使肿瘤细胞在原发部位向外与细胞膜的粘附能力下降,肿瘤向外转移的能力随之下降;并且降低了其与淋巴结被膜下窦、淋巴管输入与输出之间等的粘附功能,使肿瘤的侵袭与转移能力下降;并抑制金属蛋白酶MMP9对细胞外基质的降解,从而切断了淋巴道转移的途径有关.
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