【摘 要】
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人参是我国中药宝库中的传统中药材,随着人参药用价值研究的不断深入,野生人参分布密度锐减,由此引发的野生资源保护以及供需矛盾等问题日益突出.我国的人参栽培历史悠久,人工栽培方式一定程度上缓解了市场供需压力,但由于现今人参抚育技术不够完善,导致人参真菌性病害问题频发,人参产量仍然无法保证.目前,人参真菌性病害的防治主要通过人为施加化学农药,其在短期内可以起到防治作用,但长期施用后不仅促使抗药性病害的再
【机 构】
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吉林农业大学中药材学院,省部共建生态恢复与生态系统管理国家重点实验室,吉林长春130118
【出 处】
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2016首届中国中药资源大会暨CSNR中药及天然药物资源研究专业委员会第十二届学术年会
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人参是我国中药宝库中的传统中药材,随着人参药用价值研究的不断深入,野生人参分布密度锐减,由此引发的野生资源保护以及供需矛盾等问题日益突出.我国的人参栽培历史悠久,人工栽培方式一定程度上缓解了市场供需压力,但由于现今人参抚育技术不够完善,导致人参真菌性病害问题频发,人参产量仍然无法保证.目前,人参真菌性病害的防治主要通过人为施加化学农药,其在短期内可以起到防治作用,但长期施用后不仅促使抗药性病害的再度出现,人参品质也随之降低,与此同时土壤农残、土壤微生态失衡等问题堪忧.基于市场对人参药材品质和产量的迫切要求,人们已经将目光转向了生物防治途径.为获得对人参真菌性病害具有较好防治效果的生防菌株,本研究从人参根际土壤分离纯化出多株细菌,探讨了其对常见人参病害病原菌的抑菌效果,并对其定殖能力、防病效果以及分类学地位进行研究分析,旨在为人参真菌性病害的生物防治提供理论基础.本研究主要研究方法及结果如下：1.从吉林省抚松县万良镇人参规范化栽培基地采集健康人参植株的根际土壤样品,从中共分离获得细菌289株.以恶疫霉菌(Phytophthora cactorum)、立枯丝核菌(Rhizoctonia solani Kühn)、链格孢霉菌(Alternaria panax Whetz)、毁灭柱孢菌(Cylindrocarpon destructans (Zinss.) Scholtan)、腐皮镰孢菌(Fusarium.solani)、灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea Pers.ex Fr.)和核盘菌(Sclerotinia schinseng 为人参病原标靶菌,采用滤纸片法和牛津杯法筛选得到对人参病原真菌具有明显拮抗效果的菌株SZ-3、SZ-4、SZ-22、SZ-34、SZ-56、SZ-60和SZ-81.各桔抗细菌对各供试人参病原真菌的生长抑制率为53.0％～96.33％；菌株发酵滤液的抑菌带直径范围在5.07～15.0mm之间.2.利用传统的抗生素标记法,设置自然土与无菌土2个处理,分别测定了菌株SZ-3、SZ-4、SZ-22、SZ-34、SZ-56、SZ-60和SZ-81在人参栽培土及人参植株内的定殖能力.结果表明,7菌株在人参栽培土中及人参植株内均具有较好的定殖能力,各菌株在土壤中的数量总体上呈现"先降后升再降"的趋势,第30d后SZ-81消失,其他菌株定殖量仍能稳定在104cfu/g水平；7株细菌在人参植株内的定殖量均表现为参根内最大,茎中次之,叶中最少,且基本呈现"先增后减"的趋势,随着时间的延长,这7株细菌的繁殖力仍可稳定在一定的水平,表现出良好的定殖效果.另外,到第45d还能从人参根中分离到相当数量的细菌,说明菌株能够在人参根部定殖而不对人参造成病害.3采用伤根灌注法进行室外盆栽防病试验,结果表明,7株生防细菌对人参根腐病、人参黑斑病、人参立枯病、人参锈腐病、人参疫病、人参菌核病、人参灰霉病的最高防效分别为58.56％、58.14％、73.94％、63.02％、78.06％、65.89％、63.06％,优于农药对照组.差异性分析表明,生防菌与农药对照组差异显著.4.采用形态学、生理生化特征、16S rDNA及gyrB基因测序等确立菌株SZ-3、SZ-4、SZ-22、SZ-34、SZ-56、SZ-60和SZ-81的分类学地位.结果表明：菌株SZ-3、SZ-81为甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus),菌株SZ-4为死谷芽孢杆菌(Bacillus vallismortis),菌株SZ-22为土壤短波单胞菌(Brevundimonas terrae),菌株SZ-56为内生芽孢杆菌(Bacillus endophyticus),菌株SZ-34、SZ-60为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens).目前有关死谷芽孢杆菌、内生芽孢杆菌及土壤短波单胞菌防治人参真菌性病害尚无报道.研究表明,菌SZ-3、SZ-4、SZ-22、SZ-34、SZ-56、SZ-60和SZ-81具有较好的生防利用价值.
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