【摘 要】
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传染性脾肾坏死病毒(ISKNV)是虹彩病毒科细胞肿大病毒属的代表种。细胞肿大病毒属病毒是引起亚洲淡水养殖鱼类死亡的主要病原,并对亚洲淡水鱼类养殖业特别是对我国鳜鱼养
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传染性脾肾坏死病毒(ISKNV)是虹彩病毒科细胞肿大病毒属的代表种。细胞肿大病毒属病毒是引起亚洲淡水养殖鱼类死亡的主要病原,并对亚洲淡水鱼类养殖业特别是对我国鳜鱼养殖业造成巨大的经济损失。本文通过pull-down和免疫共沉淀(Co-IP)技术鉴定ISKNV的主要衣壳蛋白(MCP)与鳜caveolin-1蛋白(mCav-1)之间存在蛋白-蛋白相互作用。通过体内和体外实验证明MCP与mCav-1蛋白之间的相互作用不依赖于典型的caveolin-1的脚手架区域(CSD)。免疫荧光共聚焦结果表明,在ISKNV感染鳜仔鱼细胞(MFF-1)0到4h内,MCP与mC av-1存在从细胞膜到细胞核的共定位现象。亚细胞分离实验的结果表明,在病毒感染的早期阶段,MCP与细胞内脂质筏之间存在共迁移现象。通过RNAi技术沉默mC av-1蛋白,结果表明敲除mCav-1基因的转录并不影响病毒对细胞的结合能力,但能显著地抑制病毒进入MFF-1细胞,对病毒再起。上述研究表明,ISKNV MCP与鳜caveolin-1蛋白之间存在相互作用,并且该作用在病毒入侵过程中发挥着重要的作用,并且mCav-1蛋白在ISKNV感染的早期阶段扮演着重要的角色。
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