酶切RT-PCR产物鉴别猪瘟病毒强毒株和疫苗株

来源 :中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hrbqian
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根据GenBank上已发表的猪瘟病毒囊膜糖蛋白E2基因的高度保守区设计一对特异性引物,在该引物对跨越区内部找出Shimen株独有的限制性内切酶酶切位点BgⅢ,采取酶切RT-PCR产物的方法鉴别Shimen株和疫苗株,对该方法的特异性和敏感性进行检测。结果表明,应用该方法从Shimen株和疫苗株中均扩增出一条大小为750bp的特异性片段,疫苗株的RT-PCR产物不能被BgⅢ切开,Shimen株的RT-PCR产物则被切为大小分别为520bp和230bp的两条带。此方法可以扩增猪瘟病毒的E2基因保守片段,最小病毒RNA的检出量为3.96×10-4μg/mL.采用此方法检查了8例临床疑似猪瘟病料,结果1例感染猪瘟病毒强毒,另7例为猪瘟阴性.
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