【摘 要】
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肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)属于转化生长因子β(TGF-β)超家族中的一个成员,是骨骼肌生长发育的负调控因子,下调MSTN的表达水平,将提高下游靶基因MyoD家族成员和肌肉肌酸激酶的转录水平,从而促进动物的生肌过程.本研究通过构建黄河裸裂尻鱼MSTN基因RNA干扰(RNAi)重组腺病毒载体1P3 (DSP MSTN 273+250+1737)和1P2(DSP MSTN 195+1
【机 构】
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青海大学农牧学院动物科学系,西宁810016 青海大学生态环境工程学院,西宁810016
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肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)属于转化生长因子β(TGF-β)超家族中的一个成员,是骨骼肌生长发育的负调控因子,下调MSTN的表达水平,将提高下游靶基因MyoD家族成员和肌肉肌酸激酶的转录水平,从而促进动物的生肌过程.本研究通过构建黄河裸裂尻鱼MSTN基因RNA干扰(RNAi)重组腺病毒载体1P3 (DSP MSTN 273+250+1737)和1P2(DSP MSTN 195+1670),并将其注射黄河裸裂尻鱼肌肉组织,进行活体RNA干扰；利用Real-time和Western-blotting评估其对MSTN基因表达的沉默效果,并检测MSTN基因RNA干扰后对下游基因MyoD家族成员和肌肉肌酸激酶M-CK (Creatine kinase,CK)基因转录水平的调控作用.Real-time PCR分析结果表明,与HK组(病毒通用阴性对照组)和N组(空白对照组)相比,重组腺病毒载体1P3对黄河裸裂尻鱼肌肉MSTN基因的转录具有明显的干扰作用(P＜0.05),抑制率达53.5％；而重组腺病毒载体1P2对MSTN基因的转录无明显干扰作用(P＞0.05).Western-blotting分析结果与Real-time PCR结果相一致.同时,经1P3干扰后随着MSTN基因转录水平的下降,其下游MyoD家族成员和肌肉肌酸激酶M-CK基因表达水平显著上升.本研究结果为揭示MSTN基因的表达调控方式及其在肌肉生长发育中的作用机理积奠定了理论基础,为高原土著鱼类的繁育和新型育种提供了一定的科学依据.
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