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目的：幽门螺杆菌(H.pylori)是诱发胃炎、胃溃疡及胃癌的主要病因,我国约有50％以上人口感染.广藿香是“十大南药”之一,广藿香醇是其主要有效成分,课题组前期研究证实广藿香醇具有抑制H.pylori 脲酶、保护脲酶所致细胞损伤及抗胃溃疡的作用.本研究旨在探究广藿香醇抗H.pylori 作用及其抗菌优势.方法：体外实验部分,使用琼脂稀释法测定广藿香醇在不同pH 条件下抗3 株H.pylori标准株和12 株临床株的最小抑菌浓度(MIC),液体稀释法测定最小杀菌浓度(MBC),并测定2-5 倍MIC 广藿香醇对H.pylori 的时间-杀菌曲线.半固体穿刺法检测广藿香醇对H.pylori 运动能力的影响.GES-1 胃上皮细胞和细菌共培养的方法探讨广藿香醇抗H.pylori粘附的能力.荧光定量PCR 法检测广藿香醇对H.pylori 运动相关基因FlaA、FlaB 以及粘附相关基因AlpA、AlpB、BabA 表达的影响.扫面电镜观察广藿香醇影响H.pylori 鞭毛形成的作用,透射电镜观察药物对H.pylori 超微结构的影响.梯度诱导法对比广藿香醇、克拉霉素及甲硝唑诱发H.pylori 耐药的作用.体内实验部分,灌胃H.pylori SS1 菌株建立H.pylori 在体感染模型,探讨广藿香醇在体清除H.pylori 的作用.C57BL/6 小鼠灌胃0.25ml 菌液,隔天一次,共3 次.2 周后,采用快速尿素酶法、PCR 法及在体分离法检测感染.之后,随机将感染小鼠分为模型组、阳性组、广藿香醇1.25,2.5,5,10,20,40,80 和160 mg/kg 组.阳性组灌胃抗生素三联溶液(奥美拉唑+甲硝唑+克拉霉素),广藿香醇组灌胃相应浓度的广藿香醇,空白及模型组给以等量蒸馏水.给药2 周后,使用快速尿素酶和硼酸美兰法检测胃组织H.pyloride 感染情况.第二代基因测序法对比抗生素三联与广藿香醇治疗H.pylori 感染后,肠道微生物菌群的变化.结果：广藿香醇在pH=5.3,7 和9 条件下,抗H.pylori 标准株NCTC11637、NCTC26695和SS1 的MIC 范围在25-75 μg/ml；广藿香醇在pH=7 条件下,抗12 株H.pylori 临床株的MIC 范围在12.5-50 μg/ml.广藿香醇抗H.pylori 的MBC 在25-75 μg/ml,MIC/MBC 值均小于或等于3.时间-杀菌曲线结果表明,广藿香醇在2 倍或更高MIC 的中性和弱酸性条件下均可表现出较强的杀菌作用,其中在中性环境下5 倍MIC 浓度的广藿香醇可以在15 min 内杀灭所有细菌.抗运动能力及扫描电镜结果表明,广藿香醇可以抑制H.pylori 鞭毛形成,在5,10,20 μg/ml 浓度条件下有效抑制H.pylori 的运动能力.抗粘附实验结果表明,广藿香醇在5,10,20 μg/ml 浓度条件下可以有效的抑制H.pylori 对胃上皮细胞的粘附作用.荧光定量PCR 结果表明,广藿香醇在5,10,20 μg/ml 浓度条件下作用1 h 可以显著性抑制H.pylori粘附相关基因AlpA、AlpB 以及运动相关基因FlaA、FlaB 的表达.透射电镜结果表明,广藿香醇在25,50 μg/ml 浓度条件下作用H.pylori 1-2 h 可以使H.pylori 球变的比例增加,同时诱导细菌膨胀,并导致细胞质内出现囊泡和溶解.耐药实验结果表明,H.pylori 对甲硝唑的MIC 值增长至512 倍,对克拉霉素的MIC 值增长至256 倍,而H.pylori 在9 代内不会导对广藿香醇产生耐药.在体感染实验结果表明,使用对数期SS1 菌株,5 天3 次灌胃的方法可以成功建立H.pylori 在体感染模型.同时,广藿香醇在5 mg/kg 灌胃给药条件下可以有效降低H.pylori的在体感染率.16s 基因测序结果表明,使用广藿香醇治疗H.pylori 感染对肠道菌群的影响远低于抗生素三联疗法.结论：广藿香醇具有强大的抑制和杀灭H.pylori 的能力,并具有抑制H.pylori 运动、粘附、破坏其超微结构的作用.其抑制H.pylori 运动能力的作用与抑制鞭毛结构基因FlaA 和FlaB 的表达有关,抑制H.pylori 粘附能力的作用与抑制粘附蛋白基因AlpA 和AlpB 的表达有关.广藿香醇具备清除在体H.pylori 的能力,其中以5 mg/kg 给药量最佳.广藿香醇用于治疗H.pylori 感染,不容易诱导细菌产生耐药,且对肠道微生物的影响小于三联疗法.