【摘 要】
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为建立敏感、特异、稳定的传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2结构蛋白抗体ELISA检测方法,本研究以杆状病毒表达系统表达的重组IBDV-VP2结构蛋白为抗原,通过包被VP2单克隆抗体捕捉VP2结构蛋白的形式,建立鸡血清VP2结构蛋白抗体ELISA检测方法(VP2-ELISA).条件优化结果表明,单克隆抗体最适包被浓度为3ug/mL,VP2最佳稀释度为1∶20,夹心ELISA效价1∶12.8,被捡血
【机 构】
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江苏省农业科学院兽医研究所·农业部兽用生物制品工程技术重点实验室,南京210014
【出 处】
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江苏省畜牧兽医学会2017年学术年会
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为建立敏感、特异、稳定的传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2结构蛋白抗体ELISA检测方法,本研究以杆状病毒表达系统表达的重组IBDV-VP2结构蛋白为抗原,通过包被VP2单克隆抗体捕捉VP2结构蛋白的形式,建立鸡血清VP2结构蛋白抗体ELISA检测方法(VP2-ELISA).条件优化结果表明,单克隆抗体最适包被浓度为3ug/mL,VP2最佳稀释度为1∶20,夹心ELISA效价1∶12.8,被捡血清的稀释度为1﹕400.该方法与禽流感、鸡新城疫、鸡马立克氏病、鸡传染性喉气管炎病毒及杆状病毒阳性血清无交叉反应,对琼扩效价为1﹕32的IBDV阳性血清的最低检出量为1∶12800,ROC曲线确定的OD450nm临界值为0.236,组内、组间重复性试验变异系数均小于10％.用本研究建立的VP2-ELISA方法与进口IBDV-ELISA抗体试剂盒平行检测100份背景已知的临床鸡血清样品,总符合率VP2-ELISA(97％)高于进口ELISA试剂盒(96％).本研究为进一步研制鸡传染性法氏囊病病毒VP2结构蛋白抗体ELISA检测试剂盒奠定了基础.
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