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目的:本课题的目的是设计并制作人丝氨酸蛋白酶抑制因子Kazal 1型(SPINK1)基因的慢病毒过表达载体,并建立SPINK1过表达的稳转AsPC-1细胞株,探索其肿瘤生物学特性。方法:应用PCR方法扩增SPINK1基因序列,将其与慢病毒载体连接、转化,经电泳和基因测序进行鉴定,共转染293T细胞产生病毒颗粒,感染胰腺癌AsPC-1细胞,药筛感染后的阳性克隆并扩增,培养成SPINK1过表达稳转AsPC-1细胞株。通过Real-time PCR和Western blot的方法检测mRNA与蛋白的表达变化。用相关方法检测SPINK1基因对细胞增殖和克隆能力的影响。