端粒酶逆转录酶转染星形胶质细胞培养液对缺氧缺血神经元的保护作用

来源 :2011中国遗传学会大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:racerdan
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  目的:通过构建神经元体外缺氧缺血模型,探讨大鼠端粒酶逆转录酶转染星形胶质细胞的培养液对缺氧缺血性损伤神经元的影响。方法:构建大鼠全长TERT表达质粒pcDNA3-PERT。取新生1~3dSD大鼠处死后取大脑皮层,分离培养AS,并通过脂质体介导用pcDNA3-TERT及pcDNA3转染AS,分别作为pcDNA3-TERT转染组及pcDNA3转染组,同时以未转染质粒AS(未转染组)作为对照。免疫细胞化学染色检测各组AS特异件标志物胶质纤维酸性蛋白及目的基因TERT的表达。分别收集pcDNA3-TERT转染组、pcDNA3转染组、未转染组的AS条件培养液(astrocyteconditionedmedium,ACM),并记为TERT-ACM、p-ACM及ACM。取新生当天SD大鼠,处死后取大脑皮层进行神经元原代培养;取培养8~9d的大鼠神经元随机分为对照组、ACM组、p-ACM组、TERT-ACM组及正常组。结论:AS培养液对HI处理的神经元具有保护作用;经质粒pcDNA3-TERT稳定转染AS的培养液处理,大鼠神经元对HI损伤的耐受性的增强;TERT可能参与AS功能的调节,增强其神经保护作用。
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