异淀粉酶的重组表达及在环糊精制备中的应用

• 作 者: 吴敬;段绪果;
• 机 构: 江南大学食品科学与技术国家重点实验室,江苏 无锡 214122
• 出 处: 2013全国食品酶学与蛋白质化学论坛
• 发表日期: 2013年期

　　考察了重组异淀粉酶的发酵特点及酶学性质,并对其与环糊精制备中的应用条件进行了优化.构建了含有异淀粉酶编码基因glgX的表达载体,并转化E.coli BL21(DE3),得到了产重组异淀粉酶的大肠杆菌.重组菌摇瓶发酵36h时产酶水平达到879.2U/mL,在3L发酵罐发酵36h酶活力为6876U/mL.对重组酶进行了分离纯化及酶学性质研究,重组酶最适pH和最适温度分别为5.5和50℃,重组酶在50℃和60℃条件下的半衰期分别为35h和10h.在上述研究的基础上,在国内外首次建立了重组异淀粉酶与α-和γ-环糊精葡萄糖基转移酶(CGTase)同步转化淀粉底物高效制备α-和γ-环糊精的新工艺.在优化的条件下,淀粉底物浓度为15％时,α-环糊精转化率最高达到79.8％,γ-环糊精的转化率达到64.5％.本研究是国内外利用异淀粉酶与CGTase同步转化制备环糊精的首次报道,该结果是均代表了国内外文献公开报道的最高生产效率.