【摘 要】
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本研究利用λ噬菌体Red重组酶系统对大肠杆菌F质粒上traA基因的敲除进行了研究，选择traA基因两侧的36bp作为同源臂，PCR扩增到氯霉素抗性基因的侧翼用于替代traA基因，通过氯
【机 构】
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海军总医院中心实验科,北京 100048
【出 处】
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纪念中国微生物学会成立六十周年大会暨2012年中国微生物学会学术年会
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本研究利用λ噬菌体Red重组酶系统对大肠杆菌F质粒上traA基因的敲除进行了研究，选择traA基因两侧的36bp作为同源臂，PCR扩增到氯霉素抗性基因的侧翼用于替代traA基因，通过氯霉素抗性筛选基因敲除候选株，用噬菌体感染来验证基因敲除与否。结果可以得到氯霉素抗性的菌株，说明基因替代成功，但大多数能被噬菌体感染，只是受感染能力降低了5倍左右，说明基因并没有所有拷贝被敲除。
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