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目的:内皮祖细胞(EPC)移植是治疗冠心病、肢体缺血等血管损伤疾病的新策略,而诱导人胚胎干细胞(hESC)分化为EPC可能提供新的细胞来源,流体剪切力(LSS)可以提高EPC的分化效率,尝试通过转基因Hath6模拟LSS作用提高hESC的内皮分化效率.
方法:通过LSS处理hESC确定流体剪切力对内皮分化及Hath6基因表达的调节作用.利用过表达和shRNA表达敲除的方式对hESC进行Hath6基因修饰,再以分阶段添加细胞因子的方式诱导hESC内皮分化,通过分析细胞表面标志、内皮特异基因表达、以及细胞在基质胶(matrigel)上形成血管样结构的能力判断内皮分化水平.
结果:Hath6基因能响应流体剪切力的作用提高表达。通过基因修饰，Hath6过表达有效提高了hESC向内皮细胞的分化效率，而抑制Hath6表达出现对应的抑制内皮分化的效果。
结论:诱导人胚胎干细胞可以为血管损伤类疾病的治疗提供有效的种子细胞，利用Hath6基因转染能模拟流体剪切力提高hESC的内皮分化效率，提供充足的种子细胞来源。