【摘 要】
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目的：探讨CNN3基因编码的calponin-3蛋白对癫痫大鼠海马超微结构影响,探索其参与癫痫病理生理过程可能的机制,阐明calponin3在癫痫中的作用,加深对癫痫发病机制的理解为癫痫诊疗提供新思路及潜在的治疗靶点。材料：SPF级成年健康雄性Sprague-DaWley大鼠281只,体重(200±20g)；CNN3干扰/过表达慢病毒(上海吉满基因技术有限公司)；氯化锂(美国Amresco公司,货
【出 处】
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2016世界神经调控学会中间会议暨第七届中国神经调控大会
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目的：探讨CNN3基因编码的calponin-3蛋白对癫痫大鼠海马超微结构影响,探索其参与癫痫病理生理过程可能的机制,阐明calponin3在癫痫中的作用,加深对癫痫发病机制的理解为癫痫诊疗提供新思路及潜在的治疗靶点。材料：SPF级成年健康雄性Sprague-DaWley大鼠281只,体重(200±20g)；CNN3干扰/过表达慢病毒(上海吉满基因技术有限公司)；氯化锂(美国Amresco公司,货号0416)；匹罗卡品(美国Sigma公司,货号P6503)；兔抗calponin-3多克隆抗体(美国Santa Cruz公司；货号：sc-28546)；兔抗synaptophysin多克隆抗体(美国CST公司,货号5461)；兔抗AMPA(GLUR2)(美国CST公司,货号13607)；辣根过氧化酶(HRP)标记山羊抗兔/山羊抗小鼠IgG(H+L)(北京中杉金桥公司,货号ZB-2301/ZB-2305)阿拉丁电镜专用戊二醛(上海晶纯生化科技股份有限公司,货号：G105907)。方法：281只SD大鼠(200±20g)随机分为空白对照组、CNN3-沉默组、CNN3-沉默对照组、CNN3-过表达组、CNN3-过表达对照组。采用海马定位注射慢病毒的方法构建CNN3-沉默、CNN3-过表达模型,而对照组注射相应对照慢病毒,空白对照组不做定位注射。注射后14天,五组大鼠均给予氯化锂-匹罗卡品腹腔注射构建癫痫点燃模型。透射电镜观察点燃成功6H各组海马超微结构的改变；western blot检测点燃成功后6H各组海马calponin-3、突触素synaptophysin、AMPA(GLUR2)蛋白的表达变化。结果：透射电镜结果显示,CNN3-沉默组大鼠点燃成功后6H海马突触小泡数量少于对照组,CNN3-过表达组大鼠海马突触小泡数量较对照组增加；western blot结果示,CNN3-过表达组calponin-3、synaptophysin、 AMPA(GLUR2)表达均上调,与对照组相比差异具有统计学意义。结论：calponin-3表达水平对癫痫大鼠海马超微结构具有一定影响,calponin-3高表达可能使突触小泡数量上调而低表达则下调；synaptophysin、 AMPA(GLUR2)表达水平与calponin-3表达水平同步变化且calponin-3过表达时synaptophysin、 AMPA(GLUR2)表达均显著上调,提示calponin-3可能通过影响synaptophysin及AMPA(GLUR2)的表达参与癫痫的病理生理过程。
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