SDF-1/CXCR4轴对人根尖牙乳头干细胞的趋化作用

来源 :第九次全国牙体牙髓病学学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liongliong586
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  目的:研究基质细胞衍生因子1(SDF-1α)受体CXCR4在人根尖牙乳头干细胞(SCAP)的表达,以及SDF-1/CXCR4轴对SCAP的趋化作用.方法:收集牙根未发育完全的人第三磨牙,体外分离培养SCAP,采用RT-PCR、免疫荧光染色方法检测CXCR4在SCAP的表达;利用Transwell小室跨膜迁移模型,设置阴性对照组、SDF-1α处理组(25 ng/ml,50ng/ml,100ng/ml,200ng/ml),以及中和组(采用抗CXCR4抗体预先封闭细胞表面CXCR4与SDF-1α的结合位点后再用100ng/ml SDF-1α处理),孵育24小时后显微镜检(200x)迁移细胞并计数,分析比较各组差异.结果:RT-PCR结果可见SCAP表达CXCR4条带,免疫荧光染色结果显示SCAP细胞内有CXCR4表达;跨膜迁移实验结果显示除25ng/ml SDF-1α组外,其余各浓度SDF-1α组SCAP跨膜迁移数量与阴性对照组比较均有显著差异(F=26.003,P<0.001).其中,25ng/ml SDF-1α组迁移数量(32.25±16.02个/孔)与对照组(25.75±9.11个/孔)差异无统计学意义(P=0.206>0.05),细胞迁移数量随SDF-1α浓度升高而增加,50ng/ml SDF-1α组迁移数量(47.00±10.36个/孔)显著高于对照组(P<0.001),100ng/ml SDF-1α组迁移数量达到峰值(68.13±11.28个/孔),显著高于对照组(P<0.001),200ng/ml SDF-1α组迁移数量(49.88±6.01个/孔)略少于100ng/ml SDF-1α组,两者差异无统计学意义(P=0.136>0.05),但亦显著高于对照组(P<0.001).而中和组迁移数量(18.38±2.26个/孔)则明显减少,显著低于100ng/ml SDF-1α组(P<0.001),仅相当于阴性对照组水平(P=0.153>0.05),提示SCAP的跨膜迁移确实为SDF-1α趋化所致.结论:SCAP是SDF-1α的靶细胞;SDF-1/CXCR4轴可显著趋化SCAP发生体外跨膜迁移.
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