【摘 要】
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目的 研究探讨不同聚合度、不同脱乙酰度的壳寡糖对猪蓝耳病灭活疫苗(PRRSV)的免疫佐剂活性.方法 不同聚合度和脱乙酰度的壳寡糖COS(聚合度2-8,脱乙酰度＞95％)、COSNAC(聚合
【机 构】
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中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室,北京100190中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所,北京100850
【出 处】
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2015中国酶工程与糖生物工程学术研讨会
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目的 研究探讨不同聚合度、不同脱乙酰度的壳寡糖对猪蓝耳病灭活疫苗(PRRSV)的免疫佐剂活性.方法 不同聚合度和脱乙酰度的壳寡糖COS(聚合度2-8,脱乙酰度＞95％)、COSNAC(聚合度2-8,乙酰度＞90％)、HCOS(聚合度2-20,脱乙酰度＞95％)、50％COS(聚合度2-8,脱乙酰度≈50％)、生理盐水和油乳佐剂ISA206分别与PRRSV灭活疫苗配伍,以肌肉注射的方式免疫BalB/C小鼠,以单独注射生理盐水的小鼠作为空白对照组,初次免疫四周后进行加强免疫,加强免疫四周后进行再次加强免疫,每次免疫两周后ELISA法检测小鼠血清中PRRSV特异性N蛋白抗体的滴度及亚型、亚类；再次加强免疫两周后MTT法测定免疫小鼠脾脏淋巴细胞增殖反应,流式细胞术测定免疫小鼠脾脏淋巴细胞CD4+、CD8+、CD3+和CD 19+细胞亚群的比例,中性红比色法检测免疫小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能.结果 再次加强免疫后,寡糖COSNAC可显著增强小鼠血清中PRRSV抗体的滴度,其增强作用弱于阳性对照组；COSNAC可显著提高免疫小鼠血清中IgG1、IgG2a、IgG2b抗体的含量；COSNAC组、50％COS组IgG2b亚类抗体与PRRSV组相当,其中以COSNAC组IgG2b抗体产生的水平最高,但不及ISA206组.COSNAC组、50％COS组IgM亚类抗体显著高于PRRSV组；MTT法的结果表明,与抗原对照组和阳性对照组相比较,HCOS能明显增强免疫小鼠脾脏T淋巴细胞和B淋巴细胞的增殖反应,并且HCOS促进B淋巴细胞增殖的作用明显强于ISA206组；经流式细胞术测定,寡糖COS、HCOS、COSNAC均可显著提高免疫小鼠脾脏淋巴细胞CD4+T细胞和CD8+T细胞的比例,寡糖COS、HCOS、COSNAC均可显著提高CD3+细胞的含量及CD3+/CD19+细胞的比值,此外50％COS可显著提高CD19+细胞的比值,并且显著降低CD3+/CD19+细胞的比值；经中性红比色法测定,与ISA206组相比较,COSNAC免疫后小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能显著提高,该作用经LPS和PRRSV抗原诱导后明显增强.结论 壳寡糖可增强小鼠对PRRSV灭活疫苗的免疫应答,是一种新型的免疫佐剂,可用于猪蓝耳病等灭活疫苗的开发中.
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