【摘 要】
：
目的：探讨DNA 甲基化在PM2.5 降尘诱导大鼠急性肺损伤中的作用,阐明复合维生素B(叶酸、维生素B6、B12)减缓肺损伤的机制,为B 族维生素应用于预防PM2.5对健康造成的影响提供理论依据.方法：PM2.5 降尘样本主要采自四川绵阳的交通区和工业区,由西南科技大学提供.选56 只8-10 周龄的雄性SD 大鼠,随机分成7 组,即阴性对照组,低、中、高剂量(3.5、7.0、14.0 mg/ml
【机 构】
：
西南医科大学公共卫生学院环境与劳动卫生教研室,四川泸州,646000;四川省成都市金堂区疾控预防控制中心,四川成都,610400
【出 处】
：
中国毒理学会表观遗传毒理专业委员会第一次学术大会
论文部分内容阅读
目的：探讨DNA 甲基化在PM2.5 降尘诱导大鼠急性肺损伤中的作用,阐明复合维生素B(叶酸、维生素B6、B12)减缓肺损伤的机制,为B 族维生素应用于预防PM2.5对健康造成的影响提供理论依据.方法：PM2.5 降尘样本主要采自四川绵阳的交通区和工业区,由西南科技大学提供.选56 只8-10 周龄的雄性SD 大鼠,随机分成7 组,即阴性对照组,低、中、高剂量(3.5、7.0、14.0 mg/ml)复合维生素B 灌胃+PM2.5 染毒(2.0 mg/ml)组,低、中、高剂量(0.4、2.0、10.0 mg/ml)PM2.5 染毒组,每组8 只.复合维生素B 灌胃+PM2.5 染毒组分别用0.5 ml(3.5、7.0、14.0 mg/ml)复合维生素B 溶液连续灌胃28 d,1 次/d,其余4 组用纯净水按同种方式灌胃.28 d 后,7 组均进行非暴露式气管滴注染毒3 d,1 次/d,0.5 ml/次,每次间隔24 h.低、中、高剂量复合维生素B 灌胃+PM2.5 染毒组均采用2.0 mg/mlPM2.5 悬液染毒,低、中、高剂量PM2.5 染毒组分别采用0.4、2.0、10.0 mg/ml 的PM2.5悬液染毒,阴性对照组用0.9％的生理盐水染毒.末次染毒24 h 后,取大鼠腹主动脉动脉血清、肺组织及肺泡灌洗液.切片观察肺部病理变化,检测大鼠肺泡灌洗液中TP、LDH、AKP、ACP、MDA、SOD、CAT、IL-4 和IFN-γ的含量,测量血清中IL-4 和IFN-γ的含量及其在肺组织中mRNA 的表达,采用RT-PCR 和Western blot 测量肺组织中DNA甲基转移酶的mRNA 和蛋白表达,采用比色法定量检测肺组织基因组甲基化率.结果：与阴性对照组相比,低、中、高剂量PM2.5 降尘染毒能对大鼠肺组织造成不同程度的病理性损伤；与2.0 mg/ml PM2.5 染毒组相比,低、中、高剂量复合维生素B 灌胃+PM2.5 染毒组的大鼠肺部病理损伤均有不用程度的减轻.与阴性对照组相比,低、中、高剂量PM2.5 降尘染毒组的大鼠肺泡灌洗液中LDH、AKP、ACP、TP 和MDA 含量显著升高(P＜0.05),而SOD 和CAT 活性显著降低(P＜0.05),且TP 和MDA 含量随染毒剂量的增加而升高(P＜0.05),CAT 活性随染毒剂量的增加而降低(P＜0.05)；与2.0 mg/ml PM2.5 染毒组相比,中、高剂量复合维生素B 灌胃+PM2.5 染毒组的大鼠肺泡灌洗液中LDH、TP 和MDA 含量明显降低(P＜0.05),SOD 和CAT 活性明显升高(P＜0.05)；高剂量复合维生素B 灌胃+PM2.5 染毒组的大鼠肺泡灌洗液中AKP、ACP 含量明显降低(P＜0.05).与阴性对照组相比,中、高剂量PM2.5 染毒组的大鼠BALF、血清和肺组织中IL-4 含量和mRNA 表达显著升高,而IFN-γ含量和mRNA 表达显著降低,IL-4/IFN-γ增加(P＜0.05)；与2.0 mg/ml PM2.5 染毒组相比,中、高剂量复合维生素B灌胃+PM2.5 染毒组的大鼠肺泡灌洗液和血清中IL-4 含量明显降低,而IFN-γ含量明显升高,IL-4/IFN-γ降低,肺组织中IFN-γ的mRNA 明显升高(P＜0.05),低、中、高剂量复合维生素B 灌胃+PM2.5染毒组的大鼠肺组织中IL-4 的mRNA 表达明显降低(P＜0.05).与阴性对照组相比,中、高剂量PM2.5 染毒组的大鼠肺组织中DNMT 1 的mRNA 和蛋白表达显著降低(P＜0.05),低、中、高剂量PM2.5 染毒组中DNMT 3b 的mRNA 和蛋白表达显著升高(P＜0.05),基因组甲基化率(5-mC％)降低,且随染毒剂量的增加而降低(P＜0.05),DNMT 3a 的mRNA 和蛋白表达无显著变化(P＞0.05)；与2.0 mg/mlPM2.5 染毒组相比,中、高剂量复合维生素B 灌胃+PM2.5 染毒组的大鼠肺组织中DNMT1 的mRNA 和蛋白表达显著增加(P＜0.05),基因组甲基化率(5-mC％)显著增加(P＜0.05),而DNMT 3a、DNMT 3b 的mRNA 和蛋白表达无显著变化(P＞0.05).结论：1.PM2.5 降尘能通过DNA 甲基化来诱导大鼠肺部发生炎症和氧化应激反应,造成急性肺损伤.2.复合维生素B 能够通过逆转异常DNA 甲基化来减轻PM2.5 降尘暴露造成的急性肺损伤,对机体起到一定保护作用.
其他文献
目的：探究mm9_circ_011539 在PM2.5 暴露小鼠单核巨噬细胞RAW264.7 中的表达改变及其在DNA 损伤应答(DDR)中的功能.方法：使用0、25、50、75、100μg/ml 的PM2.5 悬液暴露RAW264.7 细胞24h 和48 h,用qRT-PCR 检测mm9_circ_011539 的表达水平,Western blot 检测RAW264.7 细胞中Y-H2AX 表达
目的 建立接近环境实际暴露水平的炭黑纳米颗粒致呼吸道上皮细胞DNA 损伤模型,寻找功能circRNA 并探讨其在炭黑纳米颗粒致人呼吸道上皮细胞DNA 损伤中的分子机制.方法 选择16HBE、BEAS-2B 细胞和BALB/c 小鼠作为研究对象,构建炭黑纳米颗粒致DNA 损伤模型,通过CCK-8、LDH 和ROS 实验检测细胞活力及氧化应激水平.通过ELISA、Western Blot、彗星实验检测
目的：探讨多环芳烃(PAHs)与金属的联合暴露、miRNA 基因上的遗传多态性、以及基因-环境交互作用对焦炉工人遗传损伤水平的影响.方法：我们选择了1385 名焦炉工人,检测其尿中多种PAHs 代谢产物和金属的浓度,用来评价个体的暴露水平；采用彗星实验和微核实验,评估个体外周血淋巴细胞遗传损伤程度；对四个常见的miRNA基因上的单核苷酸多态性(SNP)位点(包括rs11614913、rs22928
目的 微囊藻毒素-LR(microcystin-LR,MC-LR)是富营养化水中产生的一种常见水污染物,具有很强的生殖毒性.以往研究发现MC-LR 能够诱导中国仓鼠卵巢细胞内质网应激和自噬的发生,但其具体作用机制尚不明确.IRE1 通路是内质网应激通路中的一条重要通路.因此,本研究旨在探索IRE1 通路在MC-LR 诱导小鼠卵巢颗粒细胞自噬中的作用.方法 将KK-1 细胞(来源于小鼠卵巢颗粒细胞)
目的 miRNAs作为基因转录后调控因子,参与内质网(ER)驻留蛋白环氧合酶2(COX-2)介导的细胞内环境稳态调节；本研究拟探讨经由ER应激(ERS)介导外源物(如镉化合物)暴露诱导心血管细胞毒性中miRs/COX-2调控机制.方法 分离原代人脐静脉内皮细胞(HUVEC),采用CdCl2(20,40,80 μM)处理(12,24,36 h)建立细胞暴露模型；检测COX-2(PTGS2基因)、血管
目的 微囊藻毒素-LR(Microcystin-leucine arginine,MC-LR)是一种环状七肽化合物,由水生蓝细菌产生,具有强烈的生殖毒性.本研究探索组蛋白H3 在赖氨酸4(histoneH3 at lysine 4,H3K4me3)上的三甲基化作用以及氧化应激在MC-LR 诱导的SD 大鼠睾丸支持细胞凋亡中的作用.方法 常规提取、培养SD 大鼠支持细胞,分为对照组、低染毒组(MC-
目的 探讨NNK 暴露对16HBE 细胞凋亡的影响,并探索环状RNA 在NNK 所致细胞凋亡中的调控作用.材料和方法体外培养16HBE,使用不同浓度NNK(0μM,50μM,100μM,200μM,300μM)染毒48h.采用流式细胞术分析每组细胞的细胞凋亡率.通过生物信息学预测出细胞凋亡调控相关的circRNA,经qRT-PCR 验证并挑选出NNK 暴露细胞中差异表达改变最明显的circRNA.
目的 探讨组蛋白乙酰化参与微囊藻毒素-LR(MC-LR)诱导睾丸细胞凋亡的机制,研究组蛋白乙酰化的变化及其在MC-LR 致细胞凋亡和细胞周期阻滞中的作用.方法 用CCK-8 试剂盒测定半抑制浓度(IC50)为36 μg/mL,选择1/4 IC50、1/2 IC50 和IC50 浓度进行后续实验；培养原代支持-生精共培养细胞,将细胞分别用具有或不具有曲古抑素A(TSA)将其分为对照组,1/4 IC5
目的：通过细胞、动物和人群水平探讨吸烟所致胰岛β细胞炎性损伤,胰岛素功能障碍和糖尿病,及其与MALAT1 通过miR-17 调控TXNIP/mafA 通路关系,并评估穿心莲内酯的干预效果.方法：(1)以不同剂量香烟烟雾抽提物(CSE)处理胰MIN6细胞,并观察上调或下调miR-17 和/或MALAT1 及应用穿心莲内酯预处理的干预效果.(2)分别用500 mg/m3 总颗粒物(TPM)香烟烟雾(C
目的：探讨环状RNA 在4-(甲基亚硝胺)-1-(3-吡啶基)-1-丁酮(NNK)和脂多糖(LPS)联合暴露致人支气管上皮细胞(BEAS-2B)炎症反应中的调控作用。方法：通过circRNA表达谱芯片筛选差异表达的circRNA；通过细胞核质分离、RNase R 酶和放线菌素D 处理实验分析circRNA 的特性；干扰和过表达circRNA 后,采样ELISA 方法分析circRNA对细胞炎症的调