门多萨假单胞菌NK-01中a1gG基因的敲除及其褐藻寡糖的合成

• 作 者: 宫婷[1]张弛[1]王淑芳[2]宋存江[3]
• 机 构: 南开大学分子微生物与技术教育部重点实验室,天津市卫津路94号,300071
• 出 处: 2012年第五届全国微生物遗传学学术研讨会
• 发表日期: 2012年期

　　本研究克隆得到门多萨假单胞菌NK-01中的algG基因，将其插入pEX18Tc质粒中构建出了新的质粒pEX18TcG，再将从pBluescript(-)中克隆到的Amp基因插入pEX18TcG的algG基因中，得到了带有algG两端同源臂的新质粒pEX18TcGAmp，采用同源重组的方法将其导入NK-01中，通过插入的氨节抗性基因筛选敲除了algG基因的突变菌株，并将之命名为G1。利用Alginate合成培养基培养野生菌株和G1,测定二者发酵液中褐藻寡糖中β-D-甘露糖醛酸和α-L-古罗糖醛酸单体的含量，以确定获得生产甘露寡糖的突变株。